詹纳斯绿B染色液(0.5%)

Annexin V 荧光双染细胞凋亡检测试剂盒实验操作指南

Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×

线粒体和液泡系的超活染色与观察

溶液浸染，染料因其＂电化学＂特性与被染部分相互吸引被选择固定在活细胞的某种结构中而显色．但不是任何染料都可作为活体染色剂使用，一般应选择那些无毒或毒性小的碱性染料(易溶于类脂质)并配成较稀的溶液来使用。詹纳斯绿Ｂ和中性红两种碱性染料是活体染色中重要的染料，对线粒体和液泡系的染色各有专一性．詹纳斯绿B可专一性地对对线粒体进行活染，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态(即有色状态)，呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基。中性红对液泡系的染色具有专一

线粒体和液泡系的超活染色与观察

，最为适用的是碱性染料，这可能是因为它具有溶解在类脂质(如卵磷脂、胆固醇等)的特性，易于被细胞吸收。詹纳斯绿B(Janus green B)和中性红(neutral red)两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体 和液泡系的染色分别具有专一性。 实 验 目 的 1. 观察动、植物 活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布; 2. 学习一些细胞器 的超活染色技术。 实 验 原 理 线粒体是细胞进行呼吸作用的场所，其形态和数量