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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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4℃,避光,6个月保存:4℃
特别提示:包括RNA杂交缓冲液(含甲酰胺)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RNA杂交缓冲液(含甲酰胺)
产品规格:100ml
用途:用于RNA的含甲酰胺的杂交缓冲液
保存:4℃,避光,6个月
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文献和实验[试剂与仪器] (1)预杂交液:5×SSC,2×Denhardt液(或采用试剂盒的相应试剂),0.02%(W/V)SDS (2)杂交液DIGEasyHyb (3)杂交袋 (4)含0.1%SDS2×SSC和含0.1%SDS0.1×SSC [操作步骤] (1)预杂交 ①先将预杂交液热至60℃; ②将带有目的RNA的硝酸纤维素膜放入稍宽于滤膜的杂交袋,加入预杂交液,按每100cm2滤膜加20
的吸管弃去上清液,用75%乙醇清洗沉淀物,小心搅拌,尽量使沉淀物能够漂浮在乙醇上面。10、离心。4度,7 000g,5分钟。11、用1毫升的吸管弃去上清液,在空气中干燥10分钟。12、用甲酰胺(做Northern)或者DPEC水(做RT-PCR)清洗沉淀物,剂量依RNA沉淀物的多少而定(范围为50-500微升),样品在55-60度下加热10分钟。然后保存在-80度冰箱中备用。二、RNA凝胶和浓度检测检测RNA的质量:检测18s和28s核糖体RNA,样品含总的RNA-rRNA、tRNA、mRNA
73.0ml c. 加热至100℃溶解凝胶,然后置50℃水浴箱降温。加17ml甲醛,混匀并立即倒胶。须在通风橱内带手套操作,用一电泳槽专供RNA电泳。 Northern印迹 1.当凝胶仍在电泳时,裁一张与凝胶大小相同的滤纸,以20×SSC浸泡。 2.安装转移装置,盘内倒入杂交缓冲液(20×SSC)。在缓冲液平面上做一平台,将凝胶盘倒置,并盖三张经20×SSC
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