原生质体缓冲液试剂盒

杨树单个细胞核制备的植物单细胞测序方法

细胞核而不是整个细胞中表征 mRNA 的方法，帮助大家减少因制备原生质体而带来的问题。 实验材料： 杨树梢尖（Populus tremula × alba INRA clone 717 1B4）和杨树茎（nisquly -1），两种材料均具有不同程度的细胞复杂性和细胞壁结构。 试剂 10% 牛血清白蛋白封闭液、RNase 抑制剂、盐酸精胺、亚精胺、DTT、4X 细胞核分离缓冲液（40 mM MES-KOH pH 5.7, 40 mM NaCl, 40 mM KCl, 12mM MgCl2, 10 mM

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实验操作篇

，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用