N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) 克隆与表达

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名称：N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) 克隆与表达
编号：YT476
产地：国产|进口
规格：1μg
英文名：N-EGFP plasmid（with CMV promoter）
品牌：百奥莱博
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个EGFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
EGFP	677-1393
Multiple cloning site	1394-1483
T7 promoter and T7 primer binding site	1503-1524
SV40 polyA signal	1536-1919
f1 origin of ss-DNA replication	2057-2363
bla promoter	2388-2512
SV40 promoter	2532-2870
Neomycin/kanamycin resistance ORF	205-3696
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3697-4155
pUC origin	4284-4951

本质粒(5003bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

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·彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD)
编号：YT622
英文名称：Prestained Color Protein Marker
规格：200μl|600μl|3ml
本品包含了从15kD到120kD共7种纯化的预染蛋白质，其中15kD和70kD条带为红色，其余条带为蓝色(参见下图)，适合作为SDS-PAGE或Western的蛋白质分子量标准。特别适合在Western时使用，这样在转膜后可以直接并清楚地观察到转膜效果。须注意右图所示分子量仅适用于常规的Tris-Glycine凝胶。根据上样孔的大小，本彩色预染蛋白质分子量标准通常每次上样3-5微升，即可在电泳时、电泳后或转膜后观察到非常清楚的蛋白条带。

产品特点：
1. 提供了两条鲜艳的红色条带(15kD和70kD)，有利于快速准确辨认蛋白质分子量标准的条带。同时本产品中含有类似于*酚蓝的指示性红色染料，电泳时会呈现红色条带并处于最前沿。
2. 提供了从15kD到120kD共7条条带，条带清晰，分子量范围比较宽，蛋白分子量比对比较方便。
3. 本彩色预染蛋白质分子量标准已经配制在1×SDS-PAGE上样缓冲液中，可以直接使用，无需煮沸。


蛋白条带包括：15kD,25kD,35kD,45kD,55kD,70kD,120kD

注意事项：
1. 本彩色预染蛋白质分子量标准不可在100℃加热或煮沸，并不得加热至40℃以上，室温融化后混匀即可直接使用。
2. 本彩色预染蛋白质分子量标准用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制，不适用于非变性PAGE胶。
3. 预染蛋白质分子量标准每一批次的分子量大小可能有所不同，属正常现象。请参考随产品所附的说明书确定精确的分子量。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·甲*(代"酸")脱*酶
编号：YT545
英文名称：Formate Dehydrogenase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的甲*(代"酸")脱*酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，常用于NADH的再生。

CAS：9028-85-7
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：formate + NAD+ = CO2 + NADH
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。


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·CENP-A抗体
编号：YT660
英文名称：anti-CENP-A antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的人CENP-A*基端(N-terminal)的一段多肽(4-17位*基酸)进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。

本CENP-A抗体识别总CENP-A(total CENP-A)，可检测内源性的CENP-A，未发现和其它histone蛋白有交叉反应。

染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架，由四种核心组蛋白(histones)组成，包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制，细胞中组蛋白和类组蛋白
(variant histone or histone like protein)的互换，也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C，是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A，也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p)，是重要的类组蛋白，和histone H3的*基端有62%的同源性，它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3，和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的*基端47个*基酸残基没有相似性，CENP-A的*基末端可以结合核小体之间的linker DNA，协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase)，在histone H3被磷酸化后，可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase)，在histone H3去磷酸化之前，会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异，提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点，但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷，导致胚胎致死，通常不超过胚胎发育的第6.5天。

组份：
CENP-A抗体————40μl
Western一抗稀释液————20ml

免疫原种属：人
免疫原：人工合成的人CENP-A*基端(N-terminal)的一段多肽(4-17位*基酸)
宿主：兔
用途：WB,IF
交叉反应性：人
抗体识别位点：CENP-A N-terminal
CENP-A分子量：～17kD
推荐稀释比例：WB(1:500),IF(1:100)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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