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578
- 英文名:
p53-luc Reporter gene plasmid
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别提示:包括p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)
英文名称:p53-luc Reporter gene plasmid
产品规格:1μg
p53报告基因质粒是用于检测p53转录活性水平的报告基因质粒。p53质粒是以pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个p53结合位点,可以高灵敏度地检测p53的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
p53质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 5659 |
| p53 response element | 20-73 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 96-118 |
| luc2 reporter gene | 160-1812 |
| SV40 late poly(A) signal | 1847-2068 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2116-2534 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase | |
| (Neor) coding region | 2559-3353 |
| Synthetic poly(A) signal | 3378-3426 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3493-3512 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3750 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4541-5401 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5506-5659 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5608-5627 |
p53质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. p53可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
3. 紫外照射、离子辐射等可以导致DNA损伤的作用或试剂可以激活p53,可以用作p53报告基因检测时的阳性对照。
储存条件:-20℃。
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文献和实验【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的
lsdcfhyj 请教前辈,将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的 chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒,然后感染真核细胞,完全按照protocol做就行,没啥特别的,sbi的kit不错。如果经费有限,一般是用磷酸钙转染法,这种方法在《分子克隆》里面有介绍,缓冲液的ph值很关键。 lsdcfhyj
00501101 1、nf-kb荧光素酶报告基因nf-kb质粒有卖的没?哪家公司啊?或者,请教怎么构建啊,有步骤没,我对构建是一点也不懂,着急啊。 2、EMSA:我准备定Pierce公司的核蛋白提取试剂盒、化学发光EMSA试剂盒、NF-kB的探针。但是Pierce公司的尼龙膜要2800,也太贵了吧,有没有便宜点的可以做出结果来的尼龙膜哪个公司可以买,或者卖单张的。 erik nf-kb荧光素酶报告基因nf-kb质粒
【求助】请问测定报告基因荧光素酶活力需要用到哪些仪器及试剂盒?
lsdcfhyj 各位前辈,请问测定荧光素酶报告基因的荧光素酶活力需要用到哪些仪器及试剂盒?还有将含荧光素酶报告基因的质粒转染到癌细胞中建立稳定的细胞系,用哪种转染方法好些,建立稳定转染细胞系困难吗?大概几代后转染的基因会丢失? 我查看了很多文献,但是不清楚具体的操作步骤及所需用到的仪器,希望做过这方面的前辈能给我指点一下,谢谢 阳光海岛 荧光素酶的反应: Luciferin + ATP + ½02
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