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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Cell Lysis Buffer for Western & IP
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
室温保存一年。加入蛋白酶抑制剂后建议适量分装-20℃冻存,避免反复冻融。
- 规格:
100 ml
【产品概述】
Cell Lysis Buffer for Western & IP是一种比较温和的细胞和组织裂解液,其主要裂解成分为1% Triton X-100,可在非变性条件下裂解细胞,提取的蛋白样品适用于Western blot、IP和Co-IP等实验。温和的裂解方法有利于维持原有的蛋白结构,尤其适合于免疫共沉淀检测蛋白-蛋白间的相互作用,也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。该产品裂解细胞或组织后,没有非常粘滞的透明状DNA团块形成,不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。
用本产品提取得到的蛋白样品含有较高浓度的去垢剂,因此不能用Bradford法测定样品的蛋白浓度,但可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒(Cat. No. E162-01)测定蛋白浓度。
【产品组分】
Cell Lysis Buffer for Western & IP 100 ml
【主要成分】
20 mM TrisCl (pH 7.5),150 mM NaCl,1% Triton X-100,Sodium Orthovanadate,Sodium Fluoride,EDTA等
【保存条件】
室温保存一年。加入蛋白酶抑制剂后建议适量分装-20℃冻存,避免反复冻融。
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文献和实验: 2X Lysis Buffer (~500 l)/ 1X PBSSample Prep -- (a)IP: add (40 l)2X Sample Buffer (1X V PrA/S)-- (b)W: add (50 l)3X Sample BufferBoil 5'Run Gel -- 100 V through Stacking100 00 V after (in Separating)Prepare Transfer -- make fresh TB: 1L= 200ml 5X TBb
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
and measure protein concentration (BioRad assay) use 1 - 5 mg protein per IP immunoprecipitate for 2 h to ON, 4 °C wash immunoprecipitations pelleting the beads each time: 2 x 1 ml CHIP lysis buffer 2 x 1 ml CHIP
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