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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
重组蛋白表达
- 提供商:
福因德科技(武汉)有限公司
可以根据客户需求:选择不同的标签蛋白、抗性、表达元件和表达宿主。
原核表达特色:
- 蛋白可溶性表达;
- 活性蛋白表达;
- 用于蛋白质互作研究的蛋白表达;
- 蛋白质成功复性;
- 原核表达优势:
- 根据客户序列信息,Frdbio进行基因优化分析:mRNA、密码子偏爱性等多维度优化。2. 多种表达载体和宿主菌供选择。
| 服务内容 | 价格 | 周期 | 交付标准 | 备注 | |
| 基因优化合成 | 市场优惠时价 | 含合成基因质粒和克隆菌 | |||
| 蛋白表达 | *验证测试 | 500元 | 5个工作日 | 含目的基因的表达质粒+克隆菌株+表达菌株 | |
| *表达保证型 | 2000元 | 10个工作日 | 不成功不收费 | ||
| *上清保证型 | 4500元 | 15个工作日 | |||
| 蛋白纯化 | 1-3mg蛋白,纯度>85% | 根据蛋白难度协商定价 | 5个工作日 | ||
| 3-5mg蛋白,纯度>85% | 5个工作日 | ||||
| 5-10mg蛋白,纯度>85% | 10个工作日 | ||||
表达保证型:由Frdbio设计表达方案,表达目的蛋白的全长或者部分片段;
上清保证型:由Frdbio设计表达方案,表达目的蛋白的全长或者部分片段,并且保证其表达状态为上清可溶。
哺乳动物细胞蛋白表达
Frdbio配套的cDNA基因文库、自主知识产权的pFrd系列载体以及医药研发级别的工程细胞系,提高蛋白表达的成功率和产量。Frdbio可提供瞬转HEK293细胞和稳转CHO细胞系
| 服务名称 | 服务内容 | 周期 |
| 表达系统选择 | 自主知识产权的优化表达载体Frdbio系列,自主驯化高表达量293和CHO细胞 | |
| 表达载体构建 | 基因优化及合成,亚克隆到真核表达载体无内毒素质粒抽提。 | 2-4周 |
| 瞬转小试 | 细胞顺转,表达小试,表达分析鉴定 | 2-3周 |
| 表达纯化 | 表达条件优化、SDS-PAGE/WB分析鉴定、最优条件80ml扩大及纯化测试、标签去除测试(可选)。 | 2-4周 |
| 大规模发酵与纯化 | 无内毒素质粒大提、质粒质控及瞬时转染、蛋白亲和纯化(或其他纯化方式)、蛋白buffer置换浓缩、蛋白SDS-PAGE/WB 鉴定、MS鉴定(可选)。 |
*不同蛋白表达差异较大,我们尽可能在小试阶段尽可能多提供蛋白以满足您的蛋白需求。
*正我们使用标签(His,HA,cMyc)特异性抗体检测蛋白是否表达;
*如果选择不带标签表达,后期纯化费用会非常高,且需要提供蛋白特异性抗体用于检测蛋白。
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文献和实验先来看下传统重组蛋白表达系统: 传统重组蛋白表达系统应对的挑战: 操作流程长:5天-4周时间 很多蛋白不能在细胞内成功表达 不可以改造目标蛋白 以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统,具有表达量高和成本低的优点,但是蛋白质翻译后缺乏加工机制(比如形成二硫键和蛋白糖基化等),且很难保留生物活性。 以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近真核生物等优点,但是部分蛋白产品易降解,表达量不可控。 哺乳动物细胞和昆虫
1、研究中该如何选择 AAV 血清型和剂量? 您可以在我们的血清型选择指南中找到所有血清型和组织趋向性的介绍。 2、重组 AAV 是复制缺陷的吗? 对于野生型 AAV,如果没有辅助病毒(如腺病毒)的存在,其复制效率极低。对于现在生产的重组 AAV,复制和衣壳基因是在 Rep/Cap 质粒中提供的。只有 AAV 基因组的两个 ITR(倒置末端重复序列)被保留并包装成病毒颗粒,而所需的腺病毒基因要么是由腺病毒提供的,要么是由另一个质粒提供的。理论上,重组 AAV 是不可能复制的。 3、AAV
shuxian1 目前有哪些方法或手段可以提高外源基因在植物中的表达水平? 熟鱼片 植物重组蛋白表达现状的一篇综述文章 shuxian1 谢谢了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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