SY0058型萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒哪里卖

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括SY0058型萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒哪里卖在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：SY0058型萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒哪里卖
编号：SY0058
规格：100T|500T|1000T
英文名：Luciferase Reporter Gene Assay Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件（如启动子、增强子和沉默子等）和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。本萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒（Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit），是通过萤火虫荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶。荧光素酶在 Mg2+和 O2 参与下催化荧光素氧化成oxyluciferin，在荧光素的氧化过程中，发出生物荧光（bioluminomescence），然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物荧光。

产品特点
1）简便，快捷。
2）灵敏度高，可检测10-20 mol的荧光素酶。
3）安全，非放射性。
4）酶的浓度线性范围可达8个数量级。

产品组份：

 

组分	100T	500T	1000T
细胞裂解液	60ml	60ml×5	60ml×10
萤火虫荧光素酶检测试剂	10ml	10ml×5	10ml×10

保存：未拆封试剂盒-20℃避光保存，有效期为 6 个月。-70℃避光保存，有效期为一年。试剂盒内萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）避光保存，不能反复冻融。

实验步骤

1. 细胞裂解：
1）将转入报告基因的细胞中的培养基移除，加PBS轻轻洗涤。按如下方案加入细胞裂解液（Cell lysis buffer），然后将培养板放在微型振荡器上室温振荡15min，充分裂解细胞。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
细胞裂解液（µl/孔）	30µl	60µl	120µl	250µl	500µl

【注】：裂解产物可室温保存6h，4℃保存16h，-70℃可长期存放。（裂解产物不能多次反复冻融）。
2）将充分裂解后的裂解产物，10000-15000rpm离心3-5min。离心后将上清液移入新的EP管中进行后续检测。
2.荧光素酶检测：
1）按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开，设定参数，测定时间为10s，测定间隔为2s。
2）将样品按照20～100µl的体积（如果样品量足够，请加入100µl）加入测量管中（保持每次样品的加样量一致），另外加入萤火虫荧光素酶检测试剂（Firefly luciferase assay reagent）混匀 2-3 次（不能漩涡混匀），充分混匀后测定RLU（Relative light unit），同时设置细胞裂解液（Cell lysis buffer）为对照孔。

注意事项
1）温度会对酶的活性会产生影响，因此所有试剂应放置室温后再使用。
2）如用单管荧光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致。
3）萤火虫荧光素酶催化的生物发光的最强发光波长为 560nm。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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·Alexa Fluor 594标记链霉亲和素
编号：SY0748
英文名称：Alexa Fluor 594 Streptavidin
规格：100μl
本品是Alexa Fluor 594标记的链霉亲和素，其激发波长和发射波长分别是591nm和614nm，建议工作液浓度：0.25-1µg/ml for most applications。

链霉亲和素是一种来源于阿维丁链霉菌（streptomyces avidinii）的生物素结合蛋白，其非特异性结合远比亲和素低，且与蛋清亲和素在中性pH值具有净正电荷和包含大约7%的碳水化合物相比，链霉亲和素蛋白具有在中性pH值几乎没有净电荷，不含有碳水化合物等更有利的化学性质，所以它被广泛用来作为抗生物素蛋白的替代品。

链霉亲和素浓度：0.9 mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶，50%甘油）
荧光基团：Alexa Fluor 594 ,Ex/Em=591nm/614nm
防腐剂：0.025% 叠氮化*
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


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·Alexa Fluor 488-N-羟基琥珀酰亚胺酯
编号：SY0602
英文名称：Alexa Fluor 488 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
规格：1mg
本品是一种亮绿色荧光染料，具有水溶性和较强的pH稳定性（pH4-10），可被488nm激发产生信号稳定的荧光，常作为一种细胞标记物偶联到抗体、多肽、蛋白、示踪剂和其他底物上广泛用于细胞成像和检测。

Alexa Fluor 488 NHS Ester，即含N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide）活化基团的Alexa Fluor 488，可直接与生化分子上的*基（-NH2）反应形成稳定的酰胺键，主要是伯胺，可用于标记任何含伯胺的蛋白、多肽、*基修饰的寡核苷酸或者其他含*基的生物分子。

荧光团（Fluorophore Label）：Alexa Fluor 488 dye
活性基团（Reactive Group）：NHS ester
反应性（Reactivity）：伯胺（R-NH2）
分子式：C25H15Li2N3O13S2
分子量：643.4
外观：粉末
Ex/Em：494/517 nm
摩尔吸光系数：71,000 cm-1M-1
校正因子（CF280）：0.11
储存条件：-20℃，有效期3个月
结构式

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