腔肠素f 报告基因检测

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应腔肠素f 报告基因检测，产品信息：

类别：报告基因检测

英文名：Coelenterazine f

产品名	CAS号	包装规格
腔肠素f	123437-16-1	1×500μg

本品为粉末形式供应的腔肠素f（Coelenterazine f），与天然腔肠素结构上的唯一差别在于将其R-1位酚基上的羟基替换成氟（F），是水母发光蛋白（aequorin）的首选底物。当腔肠素f和水母蛋白（Apoaequorin）一起被部分氧化得以活化，生成腔肠素的亚稳态复合物（aequorin）。与天然腔肠素-水母蛋白（Apoaequorin）复合物产生的光子总数相比，此复合物仅产生80%的光子能。但是其优点在于：仅需非常少的时间来生成aequorin复合物（通常来说此步反应很慢，比如60min内仅有40%的天然腔肠素完成反应）。另外，当其与Ca2+接触，即可快速且高产量的发光，产能强度是天然腔肠素的20倍。具有最好的细胞渗透性。当需要极高的Ca2+检测灵敏度来研究水母蛋白再生实验，推荐使用本底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。

图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

CAS：123437-16-1

分子式：C26H20FN3O2

分子量：425.46

外观：黄色至褐色粉末

溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO

纯度：＞95%（TLC）

结构：

运输和保存方法：冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存，最好保存在惰性气体下以避免接触空气。

注意事项

1）腔肠素f粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成f氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

腔肠素f 报告基因检测专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：Coelenterazine f,腔肠素f,123437-16-1

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编号	类别	名称
SY0115	报告基因检测	pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒
SY0108	报告基因检测	Rb-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0426	蛋白质研究	6×His Tag多肽
SY0741	二抗	Alexa Fluor 594标记驴抗鸡IgY(H+L)
SY0279	克隆与表达	一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
SY0369	蛋白质研究	大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)
SY0612	其他细胞生物学试剂	重组人IFN-α2a
SY0501	细胞凋亡与增殖	Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
SY0184	报告基因检测	C/EBPα-GFP报告基因质粒
SY0332	蛋白质研究	斑蝥素(蛋白磷酸酶2A抑制剂)
SY0266	RNA纯化	RNase抑制剂(鼠源)
SY0168	报告基因检测	LXR-GFP报告基因质粒
SY0412	蛋白质研究	27mm透析袋(透析分子量7kDa)
SY0462	蛋白质研究	多聚L-赖氨酸溶液(5mg/ml)(分子量15万～30万)
SY0343	蛋白质研究	30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺，29:1
SY0150	报告基因检测	ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒
SY0756	免疫检测	DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)
SY0333	蛋白质研究	微囊藻素(PP1和PP2A抑制剂)(Microcystin-LR)
SY0627	培养基配套试剂	rac-GR24 独脚金内酯
SY0293	核酸扩增(PCR)	逆转录酶
SY0435	蛋白质研究	Anti-His标签亲和纯化凝胶
SY0614	其他细胞生物学试剂	重组人IFN-γ
SY0650	一抗	小鼠抗Myc-tag单克隆抗体

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