脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺折扣价

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名称：脱氧核糖核酸酶I，来源于牛胰腺折扣价
编号：SY0270
规格：15KU
英文名：Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas
品牌：百奥莱博
产地：北京
脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸酶，属核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从牛胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。

本品来自牛胰腺，由四种色谱区分的组分A，B，C，D构成，摩尔比为4:1:1，而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白或RNA样品中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含*化*的冻干粉形式供应，酶活力≥2000Kunit Units/mg蛋白。

中文别名：脱氧核糖核酸I；5′-寡核苷酸-水解酶；
英文别名：DNase I; Deoxyribonucleate; 5’-Oligonucleotidohydrolase;
CAS：9003-98-9
分子量：~31kDa
孔尼茨单位：≥2000Kunit Units/mg protein
类型：Type IV
最佳PH：7～8
外观：白色至浅褐色冻干粉
纯度：Protein: ≥80% by Biuret
溶解性：0.15M NaCl：5mg/ml，无色透明溶液
激活剂：多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+
抑制剂：β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白
活力单位定义：25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

储存条件：-20℃，有效期3年。

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KFS161 线粒体紫红荧光探针 MitoDeedRed
SY0397 GST标签蛋白纯化预装柱 Glutathione 4FF Chromatography Column, 1ML
SV0218 BspQI限制性内切酶 BspQI Restriction Endonuclease
BTN81224 BCIP/NBT显色试剂盒 BCIP/NBT Chromogenic Kit
HR0259 RIPA裂解液(蛋白裂解液) RIPA lysis solution (protein)
SY0038 热启动高保真酶 HotStart Pfu DNA Polymerase
YT120 细胞凋亡DNA断裂片段提取试剂盒 DNA fragmentation Extraction Kit
BTN131117 DNA包被溶液 DNA Coating Solution
SV1587 重组人源组蛋白 H4 Recombinant human protein H4
YT326 胰岛素抵抗诱导剂(葡萄糖胺) Glucosamine
WE0111 BaldStar Taq DNA Polymerase BaldStar Taq DNA Polymerase
SY0778 免疫染色用一抗二抗稀释液 Primary&Secondary Antibody Diluent for Imunostaining
SV0871 Taq DNA 聚合酶（提供标准 Taq 缓冲液）
WE0314 免疫组化试剂盒(兔源一抗) Rabbit HRP Kit(DAB)
KFS058 10×Tris-甘*酸蛋白电泳缓冲液
SY0285 一步法快速克隆试剂盒 Plus One Step Cloning Kit
RFT180 新霉素溶液(50mg/ml) Neomycin solution
BTN111116A 一站式GST标记蛋白质微量纯化套装 One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(A)
HR0051 脑组织蛋白提取试剂盒 Brain tissue protein extraction kit
YT872 封闭液(用PBS配置，含吐温20) Blocking Buffer(PBS)
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·十二烷基磺酸*溶液，10%水溶液
编号：SY0352
英文名称：10% SDS
规格：100ml
本品为含有10%SDS的双蒸水溶液。SDS即Sodium dodecyl sulfate，中文名称为十二烷基磺酸*，是一种去污剂。SDS可与蛋白质结合使蛋白质－SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异，SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构常用于聚丙*(代"烯")酰胺凝胶的配制，也可用于核酸提取过程中细胞壁的破裂及核酸蛋白复合物的分离。

储存条件：室温。

·SREBP-GFP报告基因质粒
编号：SY0157
英文名称：SREBP GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
SREBP GFP Reporter Plasmid是用于检测SREBP转录活性水平为目的的报告基因。SREBP(Sterol-regulatory element binding proteins)主要是脂类代谢的调节者。SREBP的调节失控可能会引起一些代谢性疾病，如肥胖、二型糖尿病、心血管疾病和脂肪肝等。

SREBP-GFP报告基因主要用于检测Sterol Response信号通路中SREBP的转录活性、药物研究以及过表达基因和RNAi的表型分析等。

pGMSREBP-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个SREBP结合位点，可以高效地检测SREBP的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得SREBP-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMSREBP -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMSREBP -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


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·CREB-GFP报告基因质粒
编号：SY0182
英文名称：CREB GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
CREB-GFP报告基因是用于检测CRE转录活性水平为目的的报告基因。CRE(cAMP-response element binding protein)是一种细胞核内调控因子，它通过自身磷酸化实现调节转录的功能，影响胎儿T细胞的发育、细胞的生存和学习记忆分子神经机制的相关功能。

CREB-GFP报告基因主要用于检测细胞中cAMP/PKA信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMCRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个CRE结合位点，可以高效地检测CRE的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得CRE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM CREB -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMCREB-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·RIPA裂解液(弱)
编号：SY0315
英文名称：RIPA lysis buffer (Weak)
规格：100ml
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

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