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-20℃
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
25mg
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
| Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas 脱氧核糖核酸酶I,来源于牛胰腺 |
10608ES25 | 25 mg | 873.00 |
| 10608ES60 | 100 mg | 1873.00 | |
| 10608ES80 | 1 g | 7673.00 |
产品描述
脱氧核糖核酸酶I(DNase I),即Deoxyribonuclease I,一种发现于多种细胞和组织的核酸酶,属核酸内切酶,靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键,产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸,平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA,如单链DNA、双链DNA,甚至染色质(其切割速率受组蛋白影响)。最佳的工作范围是pH7-8,DNase的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来,至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺,分子生物学实验中常用于清除蛋白或RNA样品中的DNA,或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以粉末形式供应,酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。
产品性质
| CAS号(CAS NO.) | 9003-98-9 |
| 分子量(Molecular Weight) | ~31 kDa |
| 孔尼茨单位(Kunitz Units) | ≥2000Kunitz Units/mg protein |
| 类型(Type) | Type IV |
| 最佳PH(Optimal pH) | 7~8 |
| 外观(Appearance) | 白色至浅黄色粉末 |
| 纯度(Purity) | Protein: ≥80% by Biuret |
| 激活剂(Activators) | 多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+ |
| 抑制剂(Inhibitors) | β-巯基乙醇;螯合剂;SDS;肌动蛋白 |
| 活力单位定义(Unit Definition) | 25℃,pH5.0条件下DNase催化底物DNA,使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位(Kunitz unit)。 |
运输和保存方法
冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存,有效期2年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
DNase Ⅰ储存溶液
20 mM sodium acetate(pH 6.5),5 mM CaCl2,0.1 mM PMSF,50%甘油。
DNase Ⅰ失活或抑制
加入EDTA至终浓度为2.5 mM后,65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。
使用方法(应用于蛋白提取实验,仅供参考)
1)反应体系:蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液(使其终浓度为20 U/mL),1/100体积加入1 M MgCl2。
2)反应条件:37℃,30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。
【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+,蛋白初始裂解液中要去除EDTA,否则会降低DNase I的消化能力。
HB210319
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文献和实验为对 DNA有特异作用的、可水解核苷酸间的磷酯键的具有解聚化作用的核酸酶(一种磷酸酯酶),缩写 DNase。可从各种生物和组织中分离出来,但这些酶在细胞中的作用尚不清楚。根据 DNase的作用机理,可分为二种,即可将分子链内部的磷酸二酯键水解的核酸内切酶(脱氧核糖酶Ⅰ等),以及对分子链末端分阶段作用生成单核苷酸的外切核酸酶。 DN- ase的测定方法有以下几种:( 1)对伴有 DNA分解时的粘性下降的测定;( 2)对由分解生成的酸溶性生成物量的测定(全磷量在 260毫微米时的吸收
最有代表性的核酸内切酶。最早是由 M. Kunitz从胰脏中分离出结晶的,也称为胰脱氧核糖核酸酶或 DNaseⅠ, EC3. 1. 21. 1。分子量约 3.1万,等电点 pH4.7,最适 PH 7附近,需要 Mg2 和 Mn2 。分离单链和双链 DNA,产生具有 5′ -磷酸末端的分解物。在一般条件下其分解产物含有 1到 8— 12个寡聚核苷酸,平均大小等于四个核苷酸。反应初期似乎是先分解 dpPupPy键,但因二价离子的存在对切断的方式有显著影响。因此酶容易得到结晶
相关专题 DNase I可以将DNA链消化成寡脱氧核苷酸,因此常常用于RNA提取 过程中消化掉提取核酸中所残留的DNA成分而得到高纯度的RNA产物。 DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶 I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5'端为磷酸基团,3'端









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