热启动DNA聚合酶说明书

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北京百奥莱博供应的热启动DNA聚合酶说明书用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多热启动DNA聚合酶等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：热启动DNA聚合酶说明书
编号：SY0033
规格：250U
英文名：Hot Start DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
Hot Start DNA Polymerase(HS DNA Polymerase)是经过化学修饰的热稳定重组型Taq DNA Polymerase，在室温下活性被完全封闭，只有经过95℃加热后活性才被释放，可防止在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增和引物二聚体。与基于抗体的热启动Taq酶相比，化学修饰的Hot Start DNA Polymerase活性封闭更彻底，严谨性更高；与现有化学修饰的热启动Taq酶相比，Hot Start DNA Polymerase的激活时间只需要5分钟，兼容现有的PCR程序。

Hot Start DNA Polymerase的反应缓冲液中的组分、浓度都经过优化，使得引物与模板结合的严谨性提高，从而最大程度的减少非特异扩增和引物二聚体，非常适合于从复杂模板(基因组，cDNA)中扩增低拷贝基因。PCR产物3’端带A，可克隆至T载体。另外，产品中提供的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的扩增。

产品组分：
10×HS PCR Buffer(with 20 mM MgCl2)：1.25ml
25 mM MgCl2：1ml
dNTP Mix(10 mM each)：200μl
Hot Start DNA Polymerase(5 U/μl)：50μl
5×PCR Enhancer：500μl
10×Loading buffer：1.25ml

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃ 30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：10U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：10U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50μl体系中，加入2U本品，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：PCR体系中加入1.25U本品，以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。35个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的360 bp条带。

引物设计注意事项
1）引物3’端最后一个碱基最好为G或者C；
2）引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配；
3）引物3’端尽量避免发夹结构出现；
4）引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5）引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算；
6）引物的GC含量控制在40%-60%之间；
7）正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。

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·DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)
编号：SY0756
英文名称：DAB Peroxidase Substrate Kit for Western Blot (Purple-Blue Color)
规格：1KIT
本试剂盒采用液体性滴瓶包装，使用方便，并且减少了接触有潜在毒性的DAB。DAB 即二*基联*(代"*")*(代"胺")（3,3’-diaminobenzidine），辣根过氧化物酶（Peroxidase）最常用的生色底物，在过氧化*的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成浅棕色不溶性产物，在加金属镍盐的情况下，不仅增强了显色强度，而且使显色呈鲜艳的紫蓝色，适用于免疫组化及各种印迹显色法。

产品组份：
DAB浓缩液（40×）————3ml
H2O2 浓缩液（40×）————3ml
TBS浓缩缓冲液（含*化镍，40×）————3ml

操作方法
1）DAB 显色：配制完整的DAB 显色工作液，按每2 ml 蒸馏水加显色剂A，B，C 各1滴，混匀。
2）混匀后加至膜上。
3）室温显色。一般显色1-30min。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
4）观察，照相。

储存条件：-20℃，有效期一年。


热启动DNA聚合酶说明书关键词：Hot Start DNA Polymerase,热启动DNA聚合酶,SY0033


·胶原酶III型
编号：SY0537
英文名称：Collagenase III
规格：100mg
本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性*基酸（X）和甘*酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：
1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

分子量：68-130 kDa
激活剂：Ca2+、Zn2+
抑制剂：EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum
活力单位：在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮*酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件：4℃避光，有效期两年


热启动DNA聚合酶说明书关键词：Hot Start DNA Polymerase,热启动DNA聚合酶,SY0033

KFS202 Caspase 8分光光度法检测试剂盒 Caspase-8 Colorimetric Assay Kit
RFT078 小分子蛋白电泳试剂盒 Small molecule protein electrophoresis Kit
SY0228 RXR-GFP报告基因质粒 RXR GFP Reporter Plasmid
KFS001 免疫组化笔
WE0256 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合物 Phosphatase Inhibitor Cocktail(100×)
SV0760 TspMI限制性内切酶 TspMI Restriction Endonuclease
SY0593 溶酶体绿色荧光探针 Lysosome Green DND-189
BTN130562 大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞 E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
YT268 EMSA定制探针(1.75μM) EMSA Probe(1.75μM)
SV1485 蛋白去糖基化混合液 Protein deglycosylated mixture
BTN100948 橙黄G溶液(电泳级) Orange G Solution,electrophoresis grade
BTN130647 尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI) Uracil Glycosylase Inhibitor

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