- ¥190 - 1780
- 百奥莱博
- SY0498-HDN
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
458
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销是高品质的细胞凋亡与增殖产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Hoechst 33258 染液(即用型)等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销
编号：SY0498
规格：10ml
品牌：百奥莱博
产地：北京
本系列产品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)（SY0562）为特定浓度的产品，其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)（SY0498）为浓度经过优化的产品，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品，可选购Hoechst 33258（SY0497）。
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可用于活细胞或组织的细胞核染色。
中文名称：二*甲亚胺, 三*化* 2-(4-羟基*基)-5-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基)-2,5-二-1H-*并咪唑
英文名称：2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式：C25H24N6O·3HCl
分子量：533.88
CAS：23491-45-4
纯度：≥95%（HPLC）
储存条件：-20℃，有效期12个月
结构式
使用方法
对于1mg/ml的Hoechst33258在使用时需用PBS或合适的缓冲液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 对于固定的细胞或组织
1) 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258 染色。
2) 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，并混匀。室温放置 3～5分钟。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2～3 次，每次3～5 分钟。
4) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。激发波长350nm，发射波长460nm。
2. 对于活细胞或组织：
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在适宜于细胞培养的温度培养 20～30 分钟。
c) 弃染色液，用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
·NTP套装(100 mM each)
编号：SY0056
英文名称：NTP Set (ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)
规格：4×1mL
本品为ATP、UTP、GTP和CTP共4种溶液的套装，可用于分子生物学中多种相关应用，如体外转录、RNA扩增，siRNA合成等。还可作为多种酶的反应底物或辅酶。
本品为纯度≥99%的ATP、UTP、GTP和CTP的三*盐配制所得的无色透明水溶液，pH (25℃)= 7.0±0.1，浓度为100mM，且无DNase和RNase污染。
产品组份：
| 组分名称 | 规格 | 保存 |
| ATP（100mM） | 1ml | -20℃保存 |
| UTP（100mM） | 1ml | -20℃保存 |
| CTP（100mM） | 1ml | -20℃保存 |
| GTP（100mM） | 1 ml | -20℃保存 |
注意事项
1) 可以室温溶解，溶解后需置于冰上，使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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GL1987 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒(Sol微板法) 100T
SK169 α-半乳糖苷酶检测试剂盒 α-GAL Test Kit
GL1077 增强型抗荧光淬灭封片剂 5ml|10ml
GL0645 黏蛋白异染染色液(天青A法) 100ml
GL1751 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2) 100ml|500ml
SNM558 DMEM高糖培养基(不含L谷*酰胺，不含丙*(代"酮")酸*) DMEM high glucose medium
GL0794 神经HRP示踪显色液(TMB法) 50T
GL0342 甲**(代"胺")蓝染色液(1%,硼*(代"酸")盐法) 100ml
GL1500 考马斯亮蓝快速染色液 "100ml
SNM357 石蜡切片抗酸染液 Acid-fast Stain Kit
SNM039 谷*酸脱*酶测试盒(紫外比色法) Glutamate dehydrogenase (GLDH) test kit
GL0069 Earle"s平衡盐溶液(含**糖，含酚红) 1×EBSS|10×EBSS 500ml
GL1247 P:C:I(25:24:1,pH﹥7.8) 100ml
SNM155 肝/肌糖原测定试剂盒 Liver / Muscle glycogen assay kit
GL1921 铁检测试剂盒(亚铁嗪比色法) 50T
SK108 己糖激酶检测试剂盒 Hexokinase Test Kit
GL0999 Sorensen磷酸缓冲液(1×,pH6.2) 500ml
GL2052 乳酸脱*酶(LDH)检测试剂盒(LD-L微板法) 100T
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·逆转录酶
编号：SY0293
英文名称：M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
规格：5000U
本品适用于第一链cDNA合成，cDNA 片段长度最高可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性，该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因而在cDNA 第一条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA，本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶，即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase，与M-MuLV相比，不仅改善了模板RNA可能被降解情况，且具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。
注意事项
1）为保证反转录成功，建议使用高质量的RNA样品。
2）请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
3）如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5min，冰上冷却，短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用方法
1第一条链cDNA合成（以20μl反应体系为例）
1.1 按照表【1】配制反应体系
| RNase free ddH2O | to 20μl |
| 5×Reaction Buffer | 4 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μl) | |
| or Random hexamer (0.1μg/μl) | |
| or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM) | 1 μl |
| RNase inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
| M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 1 μl |
| 模板RNA | Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng |
| 表1 cDNA第一条链合成反应体系表 | |
1.2 轻轻混匀
若使用Oligo(dT)18或基因特异性引物，42℃孵育50min。
若使用Random hexamer，25℃孵育10min，42℃孵育50min。
1.3 65℃加热15min失活M-MLV (H-) Reverse Transcriptase。
2 RT-PCR
建议取1/10～1/5体积（2～4µl）的反转录产物作为PCR模板。
2.1 按照【表2】配制反应体系表
组分体积终浓度
| cDNA模板 | 2μl | 依需要调整 |
| Forward Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| Reverse Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| 10×Taq Buffer(含Mg2+) | 5 μl | 1× |
| 2.5mM dNTPs | 4μl | 0.2 mM |
| Taq DNA Polymerase | 0.5μl | 2.5units |
| ddH2O to final volume | 50μl | / |
| 表2 RT-PCR反应体系表 | ||
2.2 按下列条件进行PCR反应：
储存条件：-20℃。
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文献和实验Hoechst33258（或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 （或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液：称取Hoechst33258（或Hoechst33342）1mg，用20ml蒸馏水溶解，过滤，4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液，pH7.0。 固定液：4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化，用PBS洗5min； 或冰冻切片用冰丙酮固定15min，吹干，用PBS洗5min； 或细胞
固定15min（同时把hoechst 33258或者其他的燃料搅拌一会） 4、滴细胞于波片上！干后 加染液 （避光） 5、半个小时左右，pbs洗三次！ 6、封片！ 4度可放几个月！ 细胞涂片没有问题！注意细胞数量，不要太多也不要太少！ 封片液：邻苯二甲酸二丁酸10ml ，聚苯乙烯25%，二甲苯70 ml,PH5.5 参谋长：hoechst33258染色好象做的不多，所以也很难找到成熟的方法。 shifang99：师兄有做过，用的好像是北京的什么碧云天的，不过好像不太好，有几次就直接
亚“G1 ”峰方法简便，但只是代表G0 /G1 期发生凋亡的细胞，S期和G2 期细胞凋亡发生于G1 峰后，无法观察。此外，由于全部细胞均经固定，因此不能区别死细胞和活细胞。Hoechst-PI染色则可弥补上述不足。Hoechst 33258 可被活细胞摄取，与DNA结合在紫外光下呈蓝色荧光。继而PI使死细胞着染产生红色荧光。因此在细胞二维直方图上根据红蓝两种荧光可分辨三种细胞：正常活细胞对染料有拒染性，蓝色和红色荧光均较少；凋亡细胞有膜通透性改变，主要摄取Hoechst染料，表现为强蓝色
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