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796
- 英文名:
EDTA Buffer(50×)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)
编号:WE0319
规格:100ml
英文名:EDTA Buffer(50×)
品牌:百奥莱博
产地:北京
福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。
注意事项:
1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
操作步骤:
1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。
2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件:2~8℃
关键词:EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×),EDTA Buffer(50×),WE0319
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| 编号 | 名称 |
| WE0267 | His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白) |
| WE0156 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料) |
| WE0288 | SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×) |
| WE0367 | 罗丹明标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0247 | TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶) |
| WE0201 | 血清血浆尿液游离RNA提取试剂 |
| WE0395 | 口腔拭子DNA样本保存管 |
| WE0114 | 2×BaHF MasterMix(含染料) |
| WE0404 | RNA样本保存液 |
| WE0359 | FITC标记兔抗人IgG(H+L) |
| WE0399 | 游离DNA样本保存管(10ml,PET) |
| WE0260 | 组织蛋白抽提试剂盒 |
| WE0353 | 抗β-Actin单克隆抗体(植物) |
| WE0116 | 2×富含GC PCR MasterMix |
| WE0253 | BL21(DE3)感受态细胞 |
| WE0309 | TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×) |
| WE0342 | HRP标记抗GST标签多克隆抗体 |
| WE0157 | miRNA cDNA第一链合成试剂盒 |
| WE0282 | 多彩预染蛋白Marker |
| WE0108 | 2×Pfu MasterMix(含染料) |
| WE0283 | Tris-甘*酸蛋白电泳液(pH8.3, 10×) |
| WE0349 | 抗HA标签单克隆抗体 |
| WE0325 | Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 |
| WE0307 | 低背景ECL化学发光检测试剂盒 |
| WE0272 | Ni琼脂糖凝胶 |
| WE0276 | BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0126 | 防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶) |
| WE0390 | AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0176 | 血液基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0254 | BL21(DE3)pLysS感受态细胞 |
| WE0141 | 快速实时荧光定量PCR预混体系 |
| WE0213 | DNase I(不含RNase) |
| WE0363 | HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L) |
| WE0346 | 抗GFP标签单克隆抗体 |
| WE0138 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(低含量ROX校正染料) |
| WE0259 | 蛋白酶抑制剂混合物 |
| WE0173 | 植物基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0350 | 抗HA标签多克隆抗体 |
| WE0242 | UltraStain DNA Marker |
| WE0335 | HRP标记抗His标签单克隆抗体 |
| WE0392 | FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0305 | 丽春红染色试剂 |
| WE0224 | RNase A溶液(10mg/ml) |
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文献和实验一、SP 法 1)脱蜡、水化;2)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;3)3% H2O2(80% 甲醇)滴加在 TMA 上,室温静置 10 分钟;4)PBS 洗 2~3 次各 5 分钟;5)抗原修复;6)PBS 洗 2~3 次各5分钟;7)滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8)滴加Ⅰ抗 50μl,室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9)4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10)PBS 洗 3 次各 5 分钟;11)滴加 Ⅱ 抗 40~50 μl,室温
我的石蜡切片又「团灭」了!没关系,专业技术人员与您并肩推塔!
1. 二甲苯脱蜡:3 × 5 min。(为确保测试时二甲苯新鲜,使用新的二甲苯)2. 乙醇水化:100% 乙醇2 × 10 min;95% 乙醇,2 × 10 min。3. 洗涤:切片浸没于ddH2O中,3 ×5 min。抗原修复4. 修复:使用200 mL ddH2O稀释后的SignalStain® EDTA Unmasking Solution#14747进行修复,根据实验室微波炉的实际情况,高火档加热2 min45sec后煮沸,立即换保温档,保温15 min。修复后切片不冷却,直接进行下一步
因素之一,AR液的PH值、浓度、化学成分也是重要的影响因素之一。使用低PH值AR液必须使用阴性对照片,以防止定位不准[9]。Shi等人[10]强调修复缓冲液的PH值对某些抗原的修复十分重要,实验中我们也发现要获得满意结果必须选择抗原修复液的最适PH值。在常规石蜡切片做AR-IHC,采用不同浓度的Alcl3液做AR液,发现4%的Alcl3取得最理想的染色[11]。在修复的抗原中,金属盐可影响蛋白的结构。郑辉等人[12]使用0.01mmol/LPBS、0.01mol/L柠檬酸缓冲液、0.1mol/L Tris
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