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文献和实验ORNL MICROARRAY HYBRIDIZATION PROTOCOLS
for 10min Immediately neutralize the mix with 5ml of 1M Tris-HCl, pH= 7.5 ・ If only using single label, add 38.5ml of 10mM Tris-HCl, pH=8.0, 1mM EDTA (Volume = 67ml) ・ For dual labels, combine the Cy3 with the Cy5 (Volume = 57ul). Then rinse Cy
mol/LTris—Borate--0.002mol/l EDTA)和TAE缓冲液(0.04moVLTris—Acetate--0.002mol/LEDTA),也可用pH7.0,0.01mol/L磷酸缓冲液。TBE缓冲液的缓冲能力较强。 在电泳过程中需马指示剂指示核酸迁移情况,常用的指示剂是溴酚蓝(Bromophenol blue,Bb,蓝紫色)和二甲苯蓝(Xylenecyanol,xc,蓝色)。溴酚蓝的结构式见图2—11,分子量很小,仅670,在通常使用的不同浓度胶中电泳时近似于自由电泳,不存
) 4. 溴酚兰 5. 琼脂糖 7. 甘油 8. DNA 染料 9. 吸头、小离心管 (三)试剂 6×DNA 电泳加样缓冲液: 甘油 30% 溴酚蓝 0. 25% Tris-Cl(pH8. 0) 70% 4℃ 保存。 室温保存,用时稀释 5 倍。 DNA 分子量标准: 200bp Ladder λDNA 分子量标准: 5ng/ul , 10ng/ul 50×TAE 电泳缓冲液贮存液配方: (50×) 每升 242g Tris 57. 1ml 冰醋酸 100ml
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