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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
584
- 靶点:
Flag
- 级别:
单克隆
- 目录编号:
WE0337
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 抗体英文名:
Anti Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
抗Flag标签单克隆单克隆抗体
- 宿主:
小鼠
- 免疫原:
重组Flag标签
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0337型抗Flag标签单克隆抗体现货,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:WE0337型抗Flag标签单克隆抗体现货
编号:WE0337
规格:100μl
英*(代"文")名:Anti Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody
品牌:百奥莱博
产地:北京
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的Flag标签(DYKDDDDK),而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的Flag-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽(DYKDDDDK)
应用范围:
WB(1:500-5000)
IP(1:50-200)
IF/ICC、ELISA(需摸索最佳稀释度)
更多有关WE0337型抗Flag标签单克隆抗体现货的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
K28094 癫痫样相关蛋白6抗体 Rabbit Anti-SEZ6L antibody
Q03075 KLK3/Kallikrein 3抗体 Anti-Prostate Specific Antigen Antibody(Mouse Monoclonal antibody)
K22345 嗅觉受体52E1抗体 Rabbit Anti-OR52E1 antibody
K13243 6号染色体开放阅读框173抗体 Rabbit Anti-C6ORF173 antibody
Q01848 Renin/REN抗体 Anti-Renin Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
Q05201 gp130/CD130/IL6ST抗体 Anti-gp130 Antibody(Rabbit Monoclonal antibody)
K24471 RSC1A1蛋白抗体 Rabbit Anti-RSC1A1 antibody
K15369 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 Rabbit Anti-ERK1 (pT202/pY204) + Erk2 (pT185/pY187) antibody
K18721 干扰素调节因子2结合蛋白样蛋白抗体 Rabbit Anti-IRF2BPL antibody
WE0340 抗VSV-G标签单克隆抗体 Anti VSV-G-Tag Mouse Monoclonal Antibody
K26597 跨膜丝*酸蛋白酶11a抗体 Rabbit Anti-TMPRSS11A antibody
K17495 副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体 Rabbit Anti-HuC antibody
WE0337型抗Flag标签单克隆抗体现货关键词:重组Flag标签抗体,WE0337,小鼠抗重组Flag标签,抗Flag标签单克隆抗体,Flag抗体
·实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)
编号:WE0145
英*(代"文")名称:BaldStar TaqMan Mixture(Low ROX)
规格:5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等,适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0144-5ml | WE0145-5ml | WE0146-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar Taq Man Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
WE0337型抗Flag标签单克隆抗体现货关键词:重组Flag标签抗体,WE0337,小鼠抗重组Flag标签,抗Flag标签单克隆抗体,Flag抗体
·双链DNA荧光定量试剂盒
编号:WE0235
英*(代"文")名称:dsDNA Assay Kit for Qubit
规格:100次|500次
本试剂盒是一种简便、灵敏、精确的双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含即用型荧光检测试剂和相关的dsDNA标准品。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性,在0.2~100ng区间具有很好的线性关系,是一种快速、简单、灵敏的DNA定量方法。
本试剂盒操作简单方便,使用时只需将即用型荧光检测试剂与待测dsDNA样品混合,即可使用荧光酶标仪或Qubit®荧光仪进行读数。操作简单,结果可靠,是二代测序大规模DNA样品定量的理想选择。本试剂盒对一些常规的污染物如蛋白质、盐类物质、洗涤剂等具有较好的耐受性。
·山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0380
英*(代"文")名称:Goat Anti-Rabbit IgG
规格:100μl
本产品为经抗原亲和纯化未标记的山羊抗兔IgG抗体,特异识别兔IgG,可与各种酶、荧光素等标记后用于免疫学、分子生物学及临床医学各个学科中,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
抗体浓度:2 mg/ml
防腐剂:无
·超纯RNA提取试剂盒
编号:WE0192
英*(代"文")名称:SuperPure RNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,裂解液充分裂解并匀质化样本,采用独特的硅基质膜吸附技术,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的RNA,同时最大限度的有效除去蛋白质、无机盐离子及有机杂质等;可从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或5×106细胞,可同时处理多个不同样品。本试剂盒提取得到的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
产品特点:
1、纯度高:最大限度除去蛋白质等杂质,提取的RNA可直接用于下游各种实验。
2、提取量大:独特的裂解液配方,充分裂解细胞或组织,RNA提取量多至100μg。
3、快速:步骤少,操作简单,节省时间。
4、兼容性强:适用于多种动植物组织和细胞RNA的提取。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213S)对RNA进行处理。
操作步骤:
1、样品处理
①植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
②动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon Reagent,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon Reagent体积的10%。
③单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量TRIzon Reagent(每10cm2 面积需要1ml TRIzon Reagent),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中,300×g离心5 min,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入TRIzon Reagent 1ml混匀。
注意:
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRIzon Reagent加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果TRIzon Reagent加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不完全,造成RNA的产量降低。
④细胞悬液:离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意:
1)加入TRIzon Reagent前不要洗涤细胞,以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
⑤血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积的TRIzon Reagent(推荐0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent),充分振荡混匀。
⑥可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后4℃,12000rpm(~~13400×g)离心10分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、重复步骤8。
10、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤11。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤11。
储存条件:室温(15~30℃)。
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【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?
检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白(Green Fluorescent Protein)的简称,由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。GFP或其突变体EGFP标签系统等被广泛用于基因表达效率的检测,以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布。我们都知道GFP抗体能应用于GFP的表达检测、纯化
抗 His 标签的抗体进行 WB 检测)且充分释放至上清中,确认蛋白是流穿还是未被洗脱 。 A:若目的 His 标签蛋白流穿 ● 样品或结合缓冲液的条件不合适,注意螯合剂或强还原剂以及咪唑的浓度。 ● His 标签蛋白与填料的结合较弱:降低上样流速或增加孵育时间;增加标签 His 的数量(常用 6~10 个)。 ● His 标签未充分暴露:在变性条件(4~8 M 尿素或 4~6 M 盐酸胍)下进行纯化或测试;重新构建克隆,改变 His 标签的位置。 ● 尝试其他的金属离子:如 Zn
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