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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
430
- 英文名：
RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温(15～30℃)
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
WE0196型固定组织RNA提取试剂盒品牌是高品质的RNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多固定组织RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：WE0196型固定组织RNA提取试剂盒品牌
编号：WE0196
规格：50次
英文名：RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总RNA。适合从小于30 mg的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总RNA，本试剂盒无需使用酚/*仿抽提和异丙醇沉淀，一小时内即可完成多个样品的抽提。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K，释放福尔马林固定或组织切片样本中的RNA，无需过夜操作；消化后的样品在较高的温度孵育后，去除由福尔马林交联造成的抑制作用，有效释放组织切片中的RNA，而避免危害RNA的完整性；优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上，而其他污染物可流过膜；可通过漂洗步骤有效去除，经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 25ml |
| 蛋白酶K | 12.5mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 过滤柱FM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RS及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
自备试剂：无水乙醇(新开封或提取RNA专用)、10mM PBS(PH7.4)(固定液中的组织)。
产品特点：
1、安全－无酚*仿等有机物抽提。
2、快速－可在一小时内完成实验。
3、高效－提取RNA得率高、纯度好。
4、可从石蜡包埋或福尔马林固定样品中提取高纯RNA。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入0.625ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
3、获得样品后，要尽快将样品在4%-10%的福尔马林中固定，固定时间以14-24小时为宜，时间过长易导致RNA断裂，影响下游实验。
4、确保包埋前的样品彻底脱水，残留的福尔马林会抑制蛋白酶K 的作用。
5、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
6、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步骤：
1、样本处理：
① 石蜡包埋样本：用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉，露出组织。
② 福尔马林等固定液中的样本：取约20 mg的样本，切成小块，置于离心管中，加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡，12000rpm(～～13400×g)离心1分钟，重复3次，可直接进行第7步操作。
2、将组织块切成5-10μM的薄片。
注意：如果样品表面已经暴露在空气中，请将接触空气的2-3片弃掉不用。
3、取约1×1cm2的切片(共约4-5片切片)置于离心管(自备)中，加入1ml二甲*，盖紧管盖，涡旋震荡10秒。
4、12000rpm离心2分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃沉淀。
5、加入1ml无水乙醇，涡旋震荡混匀。12000rpm离心2分钟，弃上清，注意不要吸弃沉淀。
注意：乙醇可以除去样品中残余的二甲*。
6、打开管盖，室温或最高至37℃孵育10分钟，直至无乙醇残留。
7、加入150μl Buffer GTL，重悬沉淀；加入10μl 蛋白酶K ，涡旋震荡混匀。
8、56℃孵育15分钟，直至样品完全溶解。80℃孵育15分钟。短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸，孵育的温度过高或时间过长可能造成RNA断裂，产生RNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温，直至水浴锅或干浴锅温度达到80℃后再把样品置于80℃孵育。
9、加入320μl Buffer GL，涡旋震荡彻底混匀。
10、将步骤9中所得到的溶液全部加入到已装入收集管的过滤柱中。12000rpm离心1分钟，收集滤液。
11、在步骤10得到的滤液中，加入720μl无水乙醇，涡旋震荡彻底混匀。
注意：加入无水乙醇后，可能有少量沉淀物析出，但不影响后续操作。
12、将步骤11中所得的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
14、重复步骤13。
15、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
注意：这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
16、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-50μlRNase-Free Water，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-20℃保存RNA。
注意：
1)RNase-Free Water体积不应小于20μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用20-50μl新的RNase-Free Water重复步骤16。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤16。
储存条件：室温(15～30℃)。
除WE0196型固定组织RNA提取试剂盒品牌外，我公司正在打折促销以下产品：
·FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)
编号：WE0385
英文名称：Rabbit Anti-Goat IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的兔抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：Immunofluorescence(1：25-100)
·IPTG溶液(50mg/ml)
编号：WE0219
英文名称：IPTG Solution(50mg/ml)
规格：5ml
本产品为FITC标记的经亲和纯化的兔抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：Immunofluorescence(1：25-100)
·组织样本RNA样品保存管
编号：WE0401
英文名称：IPTG Solution(50mg/ml)
规格：10支
本产品为FITC标记的经亲和纯化的兔抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：Immunofluorescence(1：25-100)
·细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
编号：WE0265
英文名称：Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白，所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜，释放细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高，有效避免核/浆蛋白的交叉污染，可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 | |
| Buffer A | 50ml | |
| Buffer B | 3ml | |
| Buffer C | 25ml | |
| Protease Inhibitor Cocktail | 750μl |
保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：2～8℃
注意事项：
1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2、所有样品操作请置于冰上进行。
3、可根据具体实验情况调整试剂用量，保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
4、可以采用更高的速度来离心。
使用方法：
一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
2、收集细胞，计数。离心去上清。
3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育20分钟。
注意：各种细胞的特性不同，需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm(~～13400×g)离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
1、取材，保存组织。
2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
3、称组织重量，每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail)，用匀浆器在冰上充分匀浆，放置在冰上孵育20分钟。
注意：各种组织的特性不同，需要根据不同组织调整Buffer A的用量，如果蛋白浓度小，按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B，涡旋5秒以充分混匀，放置在冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm离心 15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)，涡旋5秒以充分混匀，重悬沉淀，冰上孵育40分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟，收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中，-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
储存条件：-20℃
WE0196型固定组织RNA提取试剂盒品牌关键词：RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit,WE0196,固定组织RNA提取试剂盒
·Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
编号：WE0232
英文名称：Y Human Male DNA Quantification Kit
规格：1ml|5ml
本产品是一种检测人类男性Y染色体浓度的实时荧光定量PCR试剂盒，包括精心优化的PCR反应液、引物混合物、标准品，尤其适用于珍贵、微量DNA样本的定量检测。试剂盒采用了全新高效、快速的热启动扩增酶Goldstar Taq DNA Polymerase，有效避免常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。本品实现对Y染色体的准确定量，后续可应用于各种领域如遗传制图、物种多态性研究、疾病基因定位、亲子鉴定和法医鉴定等研究分析。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因 此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器：Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-radiCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器：ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System， QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system， Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器：ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
WE0196型固定组织RNA提取试剂盒品牌关键词：RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit,WE0196,固定组织RNA提取试剂盒
·植物蛋白提取试剂盒
编号：WE0264
英文名称：Plant Protein Extraction Kit
规格：25次|100次
本试剂盒可从新鲜、冰冻或干燥植物组织中提取可溶性植物蛋白。适用于多种植物及植物的不同部位(如根、茎、叶、花、种子等)蛋白提取，高效提取植物蛋白，比传统的方法提取蛋白产量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接进行蛋白电泳分析、免疫沉淀、Western Blot、蛋白活性测定及蛋白纯化等实验。所提蛋白可用BCA蛋白定量试剂盒(货号：WE0276)进行浓度的测定。
试剂盒组成：
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Plant Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温
注意事项：
1、本品含有1mM EDTA。
2、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后，可采用BCA法进行蛋白定量。
4、为了获得实验最佳效果，请根据实验调整最佳使用量。
使用方法：
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Plant Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、称量试验植物组织的重量。按照1 g组织加入5ml Plant Protein Extraction Reagent(在蛋白抽提前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)。
注意：
1)匀浆前将大块的植物组织剪成小块，机械匀浆器匀浆10 s，间歇10 s，反复三次进行裂解，根据组织样本不同选用适合的匀浆方式。
2)裂解液的使用量依据植物不同部位进行调整，若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少Plant Protein Extraction Reagent使用量。
3、匀浆后冰上孵育20-30分钟。
4、4℃ ～13400×g，离心20分钟。
5、收集上清中的可溶性蛋白，进行下一步的纯化或下游分析。
储存条件：-20℃
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文献和实验相关实验
在相同的模板、引物和反应体系下，用ABI7000荧光定量PCR仪也进行了其荧光定量产品和国际知名厂家A品牌，以及T品牌相关产品的对比实验。 实验材料 小鼠肝脏组织 实验方法 RNA提取：BioTeke RNApure高纯总RNA提取试剂盒，操作步骤请参考说明书。 目的基因：小鼠管家基因β–actin cDNA制备：测定小鼠肝脏总RNA浓度后，使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。 二步法荧光定量PCR： 小鼠
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2013年诺贝尔生理或医学奖落花落“基础研究”，无疑给了大家一剂兴奋：在最基础的研究上，坚持下去；在小实验室里，自由探索。丁香通试用中心为助力科研，特推出申请试用装，送丁当的活动。 活动时间：2013.10.9-10.30 活动形式：跟帖附上申请的试用装，每申请一件，送2个丁当。 格式：我申请：动物组织总RNA提取试剂盒 重点推荐：5款PCR、RNA提取试剂盒 产品特点简介： 1. 动物组织总RNA提取试剂盒：去除DNA污染；无需担心RNA降解；高纯度；高得率
有组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌或色氨酸缺陷型大肠杆菌。 2.1 菌株基因型和突变类型 2.2 不同研究领域的Ames试验的菌株组合 表1 不同研究领域的Ames试验的菌株组合比较 3 IPHASE Ames试验产品 IPHASE/汇智和源以各领域细菌回复突变试验的国家标准和指导原则为技术资料，整合了各标准中诱导S9制备方法、Ames试验菌株组合、标准诱变剂选择和相关试剂的浓度要求等技术要素，在不断的试验和优化过程中形成了遗传毒性Ames试剂盒及相关产品，助力于食品、药品、化妆
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