潮霉素B试剂供应

潮霉素B试剂供应

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  • ¥170 - 2440
  • 百奥莱博
  • QN0023-ANI
  • 北京
  • 2025年07月07日
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    • 技术资料
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      593

    • 英文名

      Hygromycin B

    • CAS号

      31282-04-9

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃别名:湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉效价:≥950U/mg潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。使用方法1. 常用筛选浓度注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。2. 杀灭曲线的建立注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")潮霉素B试剂供应,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。


    名称:潮霉素B试剂供应
    编号:QN0023
    规格:1g
    英文名:Hygromycin B
    品牌:百奥莱博
    产地:北京
    本品常用做蛋白质合成抑制剂,可用于植物细胞培养等生化研究。本品是潮霉素B干粉,用于细胞培养实验溶解后过滤除菌。推荐溶剂水,PBS溶液。

    CAS:31282-04-9
    储存条件:-20℃
    别名:湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉
    效价:≥950U/mg

    潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。

    大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

    使用方法

    1. 常用筛选浓度
    注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

    2. 杀灭曲线的建立
    注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
    1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
    2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。


    终浓度(μg/mL) 培养基体积(ml) 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml)
    50 9.9 0.1
    100 9.8 0.2
    250 9.5 0.5
    500 9.0 1.0
    750 8.5 1.5
    1000 8.0 2.0

    3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
    4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
    5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

    3. 稳定转染细胞的筛选
    1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
    注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
    2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
    3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
    4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
    5)之后更换正常培养基培养即可。

    注意事项:
    1)潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了来自大肠杆菌之外,还发现于其他的菌株,包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
    2)本品为有毒化合物,避免与皮肤和眼睛接触,请小心操作。
    3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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    潮霉素B试剂供应关键词:潮霉素B干粉,效高素,潮霉素B试剂,湿霉素乙

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    潮霉素B试剂供应关键词:潮霉素B干粉,效高素,潮霉素B试剂,湿霉素乙
      潮霉素B试剂为高校实验室,各大科研单位专用试剂,不得用于生产或者其它用途,本公司提供各种品牌的进口的试剂来满足不同客户的需求,欢迎前来订购!



    ·30%Acr/Bis(29:1)制胶液
    编号:QN1167
    英文名称:30% Acrylamide/Bis Solution, 29:1
    规格:100mL|500mL
    30% Acr-Bis(29:1)即为含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的比例为29:1。

    30% Acr-Bis(29:1)常用于配制丙*(代"烯")酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白或核酸的分离。是实验室的常用储备液。

    储存条件:4℃避光,有效期1年

    ·植物蛋白提取试剂盒
    编号:QN1070
    英文名称:30% Acrylamide/Bis Solution, 29:1
    规格:50T|100T
    植物蛋白提取试剂盒用于植物组织中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶的研究。

    试剂盒组成:
    裂解液————————————————100ml
    蛋白酶抑制剂(100x)——————————1ml
    PMSF(100x)——————————————1ml

    操作方法:
    1、植物组织蛋白的提取
    (1)去100-200mg的植物组织放入液氮中(最好过夜),在液氮环境中将植物组织碾碎(越碎越好);
    (2)加入1ml的裂解液,4℃裂解20min,期间每隔5min震荡1次;
    (3)4℃,14000转离心30min;
    (4)吸取上清至新的管中;
    (5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
    (提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

    注意事项:
    1、实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
    2、PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解;

    储存条件:-20℃



      我公司拥有专业生化试剂实验和销*(代"售")经验,为专业的您提供专业的服务。种类丰富,*基酸类、酶类、维生素类、潮霉素B试剂、缓冲剂类、色素类、植物激素及核酸类、碳水化合物类、抗生素类均有销*(代"售")。品牌代理,质量保障,其产品涉及生命科学的所有领域,包括生化试剂,抗体,ELISA试剂盒等等。


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