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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
663
- 英文名:
SDS-PAGE Resolving Gel Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京SDS-PAGE分离胶配胶液价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京SDS-PAGE分离胶配胶液价格
编号:BTN100868
规格:250mL
英文名:SDS-PAGE Resolving Gel Buffer
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的分离胶,其浓度为4×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
关于北京SDS-PAGE分离胶配胶液价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·20×SSC溶液
编号:BTN100405
规格:250mL
·动植物总蛋白微量提取试剂盒
编号:BTN90707
英文名称:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
规格:50次
本产品用于快速提取动植物总蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
产品特点:
1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 5×SDS-PAGE上样液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一:匀浆法
注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
二:直接研磨法
注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
三:液氮研磨法
注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
注意事项:
1.如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃,12000rpm离心10min,弃上清后室温风干,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。
北京SDS-PAGE分离胶配胶液价格关键词:BTN100868,SDS-PAGE Resolving Gel Buffer,SDS-PAGE分离胶配胶液
·萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒
编号:BTN130597
英文名称:Firefly Luciferase Assay Kit
规格:100次
本试剂盒采用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感,所以生物发光法是报告基因检测最常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下:
试剂盒特点:
1.高度灵敏:可检测10⁻¹⁸~10⁻²ºmol荧光素酶。
2.线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级。
3.快速简便:特别适合于高通量筛选。
4.兼容性好:与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5.本产品可足够100次荧光素酶检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液) |
20mL |
| Fassay Buffer | 10mL |
| Fassay Substrate(底物) | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有效期半年。
使用方法:
★裂解细胞:
1. 配制裂解液:临用前,取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB),用双蒸水稀释至1×ULB,混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞:倾去培养板/皿中的培养液,加入足量PBS ,轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞:按照下表中推荐的体积,在孔/皿中加入1×ULB ,混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟;培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞,将细胞悬液移入1.5mL离心管,在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定,也可离心30秒,取上清液做发光测定。
表:不同孔/皿所需1×ULB体积
| 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 35mm平皿 | 60mm平皿 |
| 50μL | 80μL | 150μL | 250μL | 500μL | 500μL | 1000μL |
★配制发光反应液:
测定前,室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate,混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate,配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★测定仪器的设置:
按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器,将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器,一般将测定延迟设为2秒,将测读时间设为10~20秒,Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★手动发光测定:
取待测样品20μl加入测量管底部,取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部,轻轻敲击管壁3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品,则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部,用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL,轻轻敲击板侧3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★自动发光测定:
配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部,启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
注意事项:
1.Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放,避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔,可分装成合适体积分次使用。
2.1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定,应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3.用多孔板同时手动测定多个样品时,要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4.本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
北京SDS-PAGE分离胶配胶液价格关键词:BTN100868,SDS-PAGE Resolving Gel Buffer,SDS-PAGE分离胶配胶液
BTN100948 橙黄G溶液(电泳级) Orange G Solution,electrophoresis grade
SV1485 蛋白去糖基化混合液 Protein deglycosylated mixture
SV0184 BsiWI限制性内切酶 BsiWI Restriction Endonuclease
KFS347 谷胱甘肽—还原酶(GR)测试盒
SY0593 溶酶体绿色荧光探针 Lysosome Green DND-189
SV0760 TspMI限制性内切酶 TspMI Restriction Endonuclease
BTN120408 绿豆核酸酶 Mung Bean Nuclease
KFS001 免疫组化笔
SY0228 RXR-GFP报告基因质粒 RXR GFP Reporter Plasmid
YT313 总抗氧化能力检测试剂盒(ABTS法) Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method
BTN100840 嘌呤霉素干粉 Puromycin Powder
ALH195 一步法荧光定量RT-PCR试剂盒 One Step qRT-PCR Kit
YT574 胞苷酸激酶 (d)CMP Kinase (Crude Enzyme)
WE0301 X光暗盒(12.7cm×17.8cm) X-Ray Cassette(12.7 cm×17.8 cm)
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迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩
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