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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
993
- 英文名:
TdT-Tailing DNA Labeling Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用方法:1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):<table width=500 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:left;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>成份<td>用量<tr><td>探针DNA<td>100-200 pmol<tr><td>TdT Buffer,5×<td>4μl<tr><td>标记核苷酸,1mM(A型需自备标记核苷酸)<td>1μl<tr><td>dATP,2mM<td>(见下注)<tr><td>TdT末端转移酶(10U/μL)<td>2μl<tr><td>超纯水<td>补到20μl</table>注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/氯仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货BTN90605A型TdT加尾法DNA探针标记试剂盒(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:TdT加尾法DNA探针标记试剂盒
编号:BTN90605A
规格:5次
英文名:TdT-Tailing DNA Labeling Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计,该反应的示意图如下:

产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3´突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| TdT缓冲液,5× | 20μl |
| TdT(末端转移酶,10U/μL) | 10μl |
| dATP,2mM | 5μl |
| 标记核苷酸 | (A、B、C不同,见注) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):
| 成份 | 用量 |
| 探针DNA | 100-200 pmol |
| TdT Buffer,5× | 4μl |
| 标记核苷酸,1mM (A型需自备标记核苷酸) |
1μl |
| dATP,2mM | (见下注) |
| TdT末端转移酶(10U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | 补到20μl |
注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/*仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。
关键词:BTN90605A,TdT加尾法DNA探针标记试剂盒,TdT-Tailing DNA Labeling Kit
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| BTN121002 | 绿如蓝核酸染料(可见光型) |
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| BTN90802 | 柱式DNA污染清除剂(大处理量) |
| BTN101116 | 柱式植物油DNA提取试剂盒 |
| BTN100210 | dNTP溶液(标记专用) |
| BTN60401 | 75%乙醇(RNase-Free) |
| BTN100815 | 溶菌酶溶液(10mg/mL) |
| BTN131216 | ATP溶液(2.5mM) |
| BTN120679 | 6nt随机引物(抗水解)(0.5mM) |
| BTN100822 | SB培养基 |
| BTN111105 | MTT检测试剂盒 |
| BTN51208C | dNTP溶液(100mM) |
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| BTN50901 | 菌落PCR试剂盒2.0 |
| BTN131289 | PLP固定液(Nakane-McLean固定液) |
| BTN130506 | PCR级海藻糖溶液 |
| BTN151103 | 超级电泳液 |
| BTN100908A | 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD) |
| BTN90503 | 电泳级甘油 |
| BTN131200 | 细胞计数液(Vi-CELL) |
| BTN100835 | 胃蛋白酶抑制剂溶液(1mg/mL) |
| BTN131080 | 重组蛋白G |
| BTN161205 | 农杆菌EHA101感受态细胞 |
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