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五年
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北京百奥莱博科技有限公司
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常温
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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Percoll厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Percoll
编号:BTN131134
规格:250mL
品牌:百奥莱博
产地:北京
Percoll是一种常用的低粘度的密度梯度介质,由直径在15-30nm的硅胶颗粒组成,颗粒外包被了聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮(PVP),为化学惰性,不会影响细胞的活性。
产品特点:
1.Percoll渗透压很低(<20mosm/kg H2O),粘度也很小,可形成高达1.3g/ml 密度。
2.采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。
3.离心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度,可用于分离各种悬浮的细胞、线粒体、叶绿体和病毒(可小到70S)。
4.由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
5.Percoll溶液高压灭菌,必须进行不添加盐或蔗糖。盐的存在会引起percoll糊化,蔗糖的存在会引起焦糖化。
储存条件:常温运输和保存,有效期五年(未开封状态)。
使用方法:
1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备:先用9 份Percoll与1份 8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
| Percoll浓度(%) | 70 | 60 | 50 | 40 | 30 | 20 |
| 比重g/ml | 1.090 | 1.077 | 1.067 | 1.056 | 1.043 | 1.031 |
2.不连续密度梯度Percoll层的制备:先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll 比重相差不大时,可将Percoll液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3.装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll 之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5.取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll 层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。
分离纯化细胞举例
1.富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五种不同密度的Percoll,如用10ml 试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2~1.5ml,初步从外周血中分离的PBMC细胞1×108悬于1ml培基中,按要求装样、离心和取样。一般富含NK 杀伤活性的LGL细胞位于42.5%与45%Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
2.纯化淋巴母细胞和除去死细胞:分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者),按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞;两层Percoll之间为淋巴母细胞,纯度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。
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| BTN131082 | 重组蛋白L |
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| BTN3080 | 植物RNA提取试剂盒 |
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文献和实验前段时间,小编的朋友圈被「我们的 18 岁」刷了屏,大家争相回忆自己曾经的似水年华。原来十年前,已经是 2009,而不再是 1999 了。,但是实验室的一些老物件却勾起了小编对于过去回忆……试剂篇这是一瓶好早以前的硫酸锌,从这个国家标准来看,应该是 1978 年后生产的。还有北京朝阳区化工四厂出品的硫酸锰。北京化工四厂 1956 年建厂, 1964 年由市区迁入房山区,是一个有 60 多年的老厂。这瓶柠檬酸三钠从批号看是 1985 年产的,比小编大了能有 10 岁。不看不知道,原来实验室很早
了外置石墨炉。随着科技的发展,世界上各大厂家开始实现了完全整体化设计,将全部分光检测系统、火焰、石墨炉和加热电热的所有部件集成于同一仪器主体中,并实现火焰和石墨炉的自由转换,北京东西分析仪器有限公司和世界同步,具有自主知识产权的AA-7000系列原子吸收光谱仪采用了最新的电路设计和制造,彻底实现了火焰、石墨炉一体化。 2、关于火焰原子吸收多元素测定的技术,主要有两类: (1)顺序多元素测定;如 北京东西分析仪器有限公司的 AA 7003M 和 美国 VARIAN 公司
的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。 Goldview从相似性对比试验结果来看
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