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北京Percoll厂家

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  • 百奥莱博
  • BTN131134-AUB
  • 北京
  • 2025年07月13日
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      711

    • 保质期

      五年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Percoll厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:Percoll
    编号:BTN131134
    规格:250mL
    品牌:百奥莱博
    产地:北京
    Percoll是一种常用的低粘度的密度梯度介质,由直径在15-30nm的硅胶颗粒组成,颗粒外包被了聚乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮(PVP),为化学惰性,不会影响细胞的活性。

    产品特点:
    1.Percoll渗透压很低(<20mosm/kg H2O),粘度也很小,可形成高达1.3g/ml 密度。
    2.采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。
    3.离心后能形成1-1.3g/mL的密度梯度,可用于分离各种悬浮的细胞、线粒体、叶绿体和病毒(可小到70S)。
    4.由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
    5.Percoll溶液高压灭菌,必须进行不添加盐或蔗糖。盐的存在会引起percoll糊化,蔗糖的存在会引起焦糖化。

    储存条件:常温运输和保存,有效期五年(未开封状态)。

    使用方法:
    1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备:先用9 份Percoll与1份 8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。

     
    Percoll浓度(%) 70 60 50 40 30 20
    比重g/ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031

    2.不连续密度梯度Percoll层的制备:先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll 比重相差不大时,可将Percoll液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
    3.装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
    4.离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll 之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
    5.取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll 层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

    分离纯化细胞举例
    1.富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化:按顺序由下向上逐层加50%、47.5%、45%、42.5%和40%五种不同密度的Percoll,如用10ml 试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2~1.5ml,初步从外周血中分离的PBMC细胞1×108悬于1ml培基中,按要求装样、离心和取样。一般富含NK 杀伤活性的LGL细胞位于42.5%与45%Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。
    2.纯化淋巴母细胞和除去死细胞:分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者),按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞;两层Percoll之间为淋巴母细胞,纯度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。
    关键词:Percoll,BTN131134,百奥莱博


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