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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
781
- 英文名:
Coomassie Blue G-250 Stain Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应考马斯亮蓝G-250染液现货促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:考马斯亮蓝G-250染液现货促销
编号:BTN80812
规格:250mL
英文名:Coomassie Blue G-250 Stain Solution
品牌:百奥莱博
产地:北京
考马斯亮蓝G250是最经典的SDS-PAGE染色方法,本产品就是基于此方法而开发的产品。
产品特点:
1.即开即用,不需要自己单独准备所有溶液。
2.不需昂贵仪器,肉眼即可观察结果,不象其他纳克级的染色方法需要贵重的仪器设备(如SYPRO 系列的高灵敏度的荧光染料需要荧光成像系统)。
3.与普通扫描仪等兼容,便于保存数据和后续处理。
4.灵敏度略高于考马斯亮蓝R250染色液。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 250ml |
| 溶液B | 250ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
1.按常规方法进行蛋白电泳。
2.凝胶电泳停止后,切除浓缩胶,转移分离胶至染色容器中。
3.倒入30-40mL溶液A,对1mm厚的PAGE胶,摇床上缓慢震荡至少10-15分钟。对1.5mm厚的PAGE胶,摇床上缓慢震荡至少2-3小时。
4.弃掉溶液A,再加入15-20mL溶液B。对1mm 厚的PAGE胶,摇床上缓慢震荡至少30-60分钟。对1.5 mm 厚的PAGE胶,摇床上缓慢震荡至少2-3小时。
5.弃掉溶液B,再加入30-40mL自备的10%的乙酸,缓慢摇动,直到在清晰的背景上出现亮蓝色的蛋白条带。一般需要1-2小时。
6.扫描或直接照相,留下实验记录。
想要了解更多关于考马斯亮蓝G-250染液现货促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
KFS293 Cisplatin (DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂) Cisplatin
SY0534 细胞消化液
SV0591 PleI限制性内切酶 PleI Restriction Endonuclease
BTN120511 CpG甲基转移酶(M.SssI) CpG Methyltransferase(M.SssI)
HR0479 Caspase 9抑制剂 Caspase 9 inhibitors
SY0171 IRF1-GFP报告基因质粒 IRF1 GFP Reporter Plasmid
YT256 STAT3凝胶迁移突变探针(1.75μM) STAT3 Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
BTN130559 大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞 E.coli Rosetta-gami(DE3) Rosetta Competent Cell
ALH161 M13噬菌体单链DNA提取试剂盒 M13 phage single strand genomic DNA rapid extraction kit
YT476 N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) N-EGFP plasmid(with CMV promoter)
WE0245 1kb DNA Ladder
BTN80801 柱式拭子DNA提取试剂盒 Swab DNA column extraction kit
SV1147 HhaI 甲基转移酶 HhaI methyl transferase
YT108 DyLight 405抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with DyLight 405-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
KFS190 Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
SY0429 VSV-G Tag多肽 VSV-G Tag Peptide
SV0289 ClaI限制性内切酶 ClaI Restriction Endonuclease
BTN100214 预混型BCIP/NBT溶液 Premixed BCIP/NBT Solution
HR0315 磷酸酶抑制剂混合物片剂 Phosphatase inhibitor mixture tablet
SY0067 RBP-JK萤火虫荧光素酶报告基因质粒 RBP-JK luciferase reporter plasmid
BTN131095 生物素化的辣根过氧化物酶 Biotin-HRP
考马斯亮蓝G-250染液现货促销关键词:BTN80812,考马斯亮蓝G-250染液,Coomassie Blue G-250 Stain Solution
·可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂
编号:BTN60901
英文名称:Taq DNA Polymerase Inhibitor
规格:0.3mL
Taq DNA聚合酶是进行PCR的最常用工具酶,但是由于它在常温下还是具有部分活性,所以经常会出现非特异的扩增产物,尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前最常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold),但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活,后者的缺点是需要预热处理使酶激活。
产品特点:
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性,即常温抑制Taq酶活性,在45℃以上抑制功能丧失,当温度降低到45℃以下后,抑制活性又得以恢复。
2. 耐热,产品本身为非蛋白质试剂,远比Anti-Taq抗体稳定,便于保存和运输。
3. 使用简单,在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广,除Taq DNA聚合酶外,还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性,如:Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前,按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀,然后再加入DNA聚合酶,启动PCR反应。
·Southern级血液DNA提取试剂盒
编号:BTN130931
英文名称:Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
规格:10次
Taq DNA聚合酶是进行PCR的最常用工具酶,但是由于它在常温下还是具有部分活性,所以经常会出现非特异的扩增产物,尤其是当PCR反应体系中有大量非特异DNA存在的时候。目前最常见的解决方法是使用抗Taq DNA聚合酶的抗体和使用经过化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶(如AmpliTaq Gold),但前者的缺点是加热后抗体会不可逆失活,后者的缺点是需要预热处理使酶激活。
产品特点:
1.可逆抑制Taq DNA聚合酶的活性,即常温抑制Taq酶活性,在45℃以上抑制功能丧失,当温度降低到45℃以下后,抑制活性又得以恢复。
2. 耐热,产品本身为非蛋白质试剂,远比Anti-Taq抗体稳定,便于保存和运输。
3. 使用简单,在加Taq酶前将本产品按PCR反应体积的1/10直接加入即可。
4.适用范围广,除Taq DNA聚合酶外,还可用于抑制其他DNA聚合酶的活性,如:Tth pol、Stoffel片段、Tfl pol、Tbr pol等。而一种酶的抗体一般对另一种酶的活性没有抑制作用。
5.与后续的RT-PCR兼容。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
在加入Taq或Tth DNA聚合酶之前,按PCR反应终体积1/10的比例将本产品加入到反应体系中混匀,然后再加入DNA聚合酶,启动PCR反应。
·DNA稀释液
编号:BTN121206
英文名称:DNA Diluent
规格:100mL
本产品为专门用于稀释核酸探针、模板等珍贵样品的稀释溶液。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
考马斯亮蓝G-250染液现货促销关键词:BTN80812,考马斯亮蓝G-250染液,Coomassie Blue G-250 Stain Solution
·无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒
编号:BTN81107
英文名称:Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是整合大提质粒DNA提取试剂盒和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我司独家推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取试剂盒低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 35ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 300μl |
| 吸附柱活化液 | 12.5ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:RNase A溶液需4℃或-20℃保存,其余成分可室温保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。
使用方法:
1. 用50mL塑料离心管收集不超过40mL的E.coli 饱和菌液,5000rpm离心5-10分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入10mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后5000rpm离心5-10分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 重复上述操作3次,得到的菌体将丢失了绝大部分细胞表面的内毒素。
4. 往细菌沉淀中加入5mL溶液A(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入并混合均匀,未用完的部分放4℃保存),充分振荡悬浮。注意:充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。
5. 加5mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放臵5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
6. 加入冰浴的7mL溶液C,颠倒混匀,冰上放臵10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
7.在等待期间,活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入2.5mL活化液,套上收集管后室温放臵2分钟,然后5000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果不活化,质粒得率将低20-40%左右。
8. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
9. 将上步得到的上清液移入到大提离心吸附柱中,放入50mL收集管中。室温放臵5分钟左右以便让质粒DNA跟膜结合。
10. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与大提离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
11. 将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
12. 重复上步一次。
13.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步很重要,不能跳过,否则残留乙醇会影响后续实验。
14. 将大提离心吸附柱放入一个干净的50mL塑料离心管中,加0.5mL DNA洗脱液3.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
15. 重复上步3-4次可洗脱更多的质粒DNA。DNA 洗脱液3.0 不够可以用TE或超纯水替代。
16. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。
注意事项:
1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2.注意溶液A:溶液B:溶液C的比例为5:5:7。若细菌量增大,需按比例放大这些溶液的使用量。
3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。一般1.5mL 过夜培养菌体可收获约10μg高拷贝质粒。
7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品,欢迎来电咨询选购考马斯亮蓝G-250染液现货促销。
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文献和实验一、目的 学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。二、原理 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白
一般R250 染蛋白,G250 一般测蛋白浓度,也可染胶,敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料,作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,,做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)。C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax
一、原理:考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调,在酸性溶液中,其以游离态存在呈棕红色,当它与蛋白质通过疏水作用结合后,变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速,约在2分钟左右的时间内达到平衡,在室温1小时之内是稳定的。在0.01一1.0mg蛋白质/m1范围内,蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制: 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95%的乙醇中,加入
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