组织/细胞线粒体分离试剂盒报价

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")组织/细胞线粒体分离试剂盒报价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：组织/细胞线粒体分离试剂盒报价
品牌：百奥莱博
规格：50T
编号：SY0328
产地：国产|进口
线粒体是绝大多数真核细胞内的一种基本的重要的细胞器，是细胞的动力工厂，细胞进行氧化磷酸化的场所。因此，对线粒体进行分离，以此为对象，对线粒体呼吸作用、mtDNA、mtRNA以及其他线粒体蛋白性能分析等具有重要意义。

本试剂盒可用于快速便捷分离组织/细胞线粒体，获得的线粒体纯度较高，且绝大部分都含有完整的内膜和外膜，可用于线粒体的生理功能等方面的研究，得到的线粒体也可被相应裂解液裂解得到线粒体蛋白，从而用于后续SDS-PAGE、Western、双向电泳及免疫共沉淀等分析。

按照每个样品使用量（细胞1-5×107个；组织：100-200 mg），本试剂盒可分别进行50个个样品的抽提。

试剂盒组份：
试剂A：100ml
试剂B：50ml
试剂C：1ml

储存条件：-20℃，有效期1年。

使用方法

1 线粒体的抽提
1）样本处理
① 组织匀浆：称取100-200 mg新鲜组织，PBS或生理盐水冲洗干净，滤纸吸干，用剪刀剪成非常小的碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1-2.5mL冰预冷的试剂A，混匀，孵育8-10min，匀浆10-30下左右，也可采用超声方法破膜。
② 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 g 离心5-10 min收集细胞。计数，每次提取需要1-5×107个细胞，加入1-2.5mL预冷的试剂A，重悬细胞，混匀，孵育8-10min，可以采用超声或匀浆器方法破膜。
2）将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4 ºC，800 g 离心5 min。
【注】：细胞核、大的膜碎片、未裂解细胞等沉淀在管底。
3）收集上清液并转移到新的离心管。4 ºC，800 g 再次离心5 min。弃沉淀。
4）将上清液转移到新的离心管。4 ºC，12,000×g 离心10 min，小心去除上清，沉淀即为分离得到的细胞线粒体。
【注】：离心后的上清含胞浆成分，尽量除去上清。

2 线粒体蛋白的抽提
1）向每毫升预冷试剂B加入10μL试剂C混匀。冰上保存数分钟待用。
2）按每10μL线粒体压积中，加入100μL上述配制好的试剂B/C溶液。
3）置于4℃旋涡振荡15-30 min 。
4）10,000rpm，4℃离心15min，取上清，即为线粒体全蛋白提取物，进行蛋白定量。
5）分装保存于-70℃，避免反复冻融。

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·Alexa Fluor 647标记兔抗山羊IgG(H+L)
编号：SY0714
英文名称：Alexa Fluor 647 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 647标记的兔抗山羊IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从兔抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的山羊IgG分子，也会与其他山羊免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 647的光谱性质类似于APC，其最大激发波长（Amax）为651nm，最大发射波长（Emax）为667nm。本品适合做单标实验。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


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·谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)
编号：SY0395
英文名称：Glutathione Agarose Resin
规格：10ml
Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载＞20mg GST融合蛋白。

此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

基质（Matrix）：4%琼脂糖微球
配体（Ligand）：通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞20mg GST protein/ml 基质（40kDa）
最大压力（PressureMax）：0.1 MPa, 1bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。
结合/洗杂缓冲液：PBS，pH7.4(140mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4)
洗脱缓冲液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 8.0
【注】：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。

使用方法
【注】样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。

1样品纯化
1）装柱：将Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。

2 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。

3 填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6M 盐*(代"酸")胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。

注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2） Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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F040307 小鼠IgG1抗原 Mouse IgG1
海柯皂苷元 Florfenicol 467-55-0
002002 无菌脱纤维兔血
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ARB12611 大鼠羟脯*酸(Hyp)elisa检测操作说明书 Rat hydroxyproline,hyp ELISA KIT
005000 4%鸡红细胞
Z-甘*酰-L-脯*酰-L-精*酰对硝基*(代"*")胺醋酸盐 2-Hydroxyphenylacetic acid 102679-70-9

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