北京现货大肠杆菌TKB1化学感受态细胞厂家直销

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名称：大肠杆菌TKB1化学感受态细胞
编号：BTN160688
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：北京
 大肠杆菌TKB1感受态细胞是由BL21(DE3)衍生而来，含有酪*酸激酶(TyrosineKinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞，简写为TKB1，带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝，该基因的启动子是LacUV5。本产品作为E.coli B 宿主菌，主要用来进行蛋白表达，细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶，能够有效避免目的蛋白的降解。
 本产品通过IPTG 诱导表达的T7 RNA聚合酶，允许其下游目的蛋白表达，从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪*酸激酶基因的质粒(pTK)。TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin 为复制起点的，包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面，那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白，能够用来筛选表达库，或者亲和纯化和蛋白印记酪*酸磷酸化蛋白。

菌种的基因型为：F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal λ(DE3)[pTK Tetr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被10-100 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟，晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

注意事项：
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(5000rpm，1分钟)收菌后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
关键词：E.coli TKB1 Chemical Competent Cell,大肠杆菌TKB1化学感受态细胞,BTN160688


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编号	名称
BTN130843	分枝杆菌RNA提取试剂盒
BTN100909	长效期SDS-PAGE配胶液
BTN81220	昆虫RNA柱式提取试剂盒
BTN80801	柱式拭子DNA提取试剂盒
BTN81213	Tricine-SDS PAGE上样液
BTN130848B	即用型LB平板培养基(含Amp)
BTN130643	烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
BTN80909	IPTG溶液
BTN130848D	即用型LB平板培养基(含Tet)
BTN120641	一站式CTAB-PAGE电泳套装
BTN131185	ONPG溶液(10mg/mL)
BTN101107	20%CTAB溶液(DNA级)
BTN130560	大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
BTN130887	植物叶绿体蛋白提取试剂盒
BTN100307D	酸洗玻璃珠(800μm)
BTN101005	即用型易错PCR试剂盒
BTN120810	血液细胞核DNA和线粒体DNA共提试剂盒
BTN131178	DNA Shuffling试剂盒
BTN80815	BCA法蛋白定量试剂盒
BTN120501	柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(测序级)
BTN100912A	长效期SDS-PAGE电泳液(＞30 KD)(干粉)
BTN100815	溶菌酶溶液(10mg/mL)
BTN81221	大肠杆菌HB101化学感受态细胞
BTN131247	4%多聚甲醛(RNA专用)
BTN131112	**酚溶液
BTN131082	重组蛋白L
BTN90708	即用型高保真PCR试剂盒
BTN161205	农杆菌EHA101感受态细胞
BTN111208A	植物线粒体纯化试剂盒A(粗提)
BTN130979	柱式血清血浆DNA提取试剂盒
BTN101104	3´RACE试剂盒
BTN130848A	即用型LB平板培养基(无抗)
BTN130537	*蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液(10mg/mL)
BTN130430	大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ
BTN70607	Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)
BTN81216	核酸清除剂
BTN130990	酵母DNA提取试剂盒
BTN130895	YPD液体培养基(YPD酵母培养基)
BTN100203	通用型LAMP试剂盒
BTN100810	超快蛋白银染试剂盒
BTN70905	2%明胶溶液(PCR级)
BTN130985	免DNA提取PCR试剂盒(细胞组织裂解物直接PCR试剂盒)
BTN130307	25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)