北京大肠杆菌TKB1化学感受态细胞品牌

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名称：北京大肠杆菌TKB1化学感受态细胞品牌
英文名：E.coli TKB1 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
编号：BTN160688
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
 大肠杆菌TKB1感受态细胞是由BL21(DE3)衍生而来，含有酪*酸激酶(TyrosineKinase)。BL21(DE3)TK感受态细胞，简写为TKB1，带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝，该基因的启动子是LacUV5。本产品作为E.coli B 宿主菌，主要用来进行蛋白表达，细胞内缺少lon蛋白酶和ompT外膜蛋白酶，能够有效避免目的蛋白的降解。
 本产品通过IPTG 诱导表达的T7 RNA聚合酶，允许其下游目的蛋白表达，从而实现对下游目的蛋白的可控诱导型基因表达。TKB1感受态细胞内含有一个能有诱导表达酪*酸激酶基因的质粒(pTK)。TKB1感受态细胞能够转化进去ColE1 Origin 为复制起点的，包含有编码磷酸化目的基团或者蛋白的质粒。如果目的蛋白是构建在一个含有亲和标签的融合表达载体上面，那么对于磷酸化蛋白的纯化就会相对比较容易。从TKB1感受态细胞中纯化得到的目的蛋白，能够用来筛选表达库，或者亲和纯化和蛋白印记酪*酸磷酸化蛋白。

菌种的基因型为：F-dcm ompT hsdS(rB-mB-)gal λ(DE3)[pTK Tetr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被10-100 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟，晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

注意事项：
1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(5000rpm，1分钟)收菌后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
3. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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8002-43-5 蛋黄卵磷脂/卵磷脂(蛋黄)
维生素B2检测试剂盒(荧光光度法)   50T
13573-16-5 雷氏盐(利英纳克盐) Reinecke salt
F030417 胶体金标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*GOLD
ARB13026 小鼠肝脂酶(HL)elisa测定使用说明书 Mouse hepatic lipase,hl ELISA KIT
BTN100909 长效期SDS-PAGE配胶液 Stable SDS-PAGE Gel Buffer
PY02-295  巧克力琼脂培养基基础  250克  
BTN60601 DNA UV防护剂 DNA UV Erasol
盐*(代"酸")四环素溶液(5mg/ml) Tetracyclin 5mg/ml 10ml
F040308 小鼠IgG2a抗原 Mouse IgG2a
ARB10703 人多巴胺D1受体(D1R)酶标法分析 Human dopamine d1 receptor,d1r ELISA KIT
HC0165 有机玻璃离心管架
ARB13473 鸡补体3裂解产物(C3SP)Elisa定量检测 Chicken complement 3 split product,c3sp ELISA KIT
BL1282 酚：*仿＝25：24(PH<5.0)
*磺酸* Giemsa′s Stain 515-42-4
PY02-393  SCHAEDLER(斯氏)琼脂  250克  
ARB13868 猪白介素12(IL-12/P40)ELISA代测服务 Porcine interleukin 12,IL-12/p40 ELISA KIT
ARB13654 兔子端粒酶(TE)检测服务 Rabbit telomerase,te ELISA KIT
焦磷酸四苄酯 Triisoamylamine 990-91-0
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·柱式Oligo回收试剂盒
编号：BTN80401
英文名称：Oligo column recovery kit
规格：50次

·Tth RecA蛋白
编号：BTN130662
英文名称：Tth RecA Protein
规格：100μg
Tth RecA蛋白是一种分离自嗜热栖热菌的RecA同源蛋白。在最适温度65-75℃范围内，Tth RecA蛋白具有依赖于ssDNA的ATPase活性。由于具有极高的热稳定性，对于需要高温反应条件的分子生物学技术，如核酸扩增和测序来说，Tth RecA蛋白是一个理想的选择。

产品特点：
1．电镜分析DNA结构
2．D环突变
3．用RecA蛋白包被的探针来进行文库筛选
4．DNA靶位点的裂解

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·一管式双链cDNA合成试剂盒
编号：BTN130308
英文名称：One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
规格：10次
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下：


cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链，其原理图如下：


产品特点：
1. 即开即用，含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA，对不含poly rA的RNA(如细菌RNA)，不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行，第一链cDNA合成后不需要任何处理，直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA，最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Oligo dT引物	10μl
cDNA第一链合成缓冲液	40μl
MMLV 逆转录酶(200U/μL)	10μl
5×cDNA 第二链合成缓冲液	160μl
20×cDNA 第二链合成酶混合液	40μl
T4 DNA聚合酶	20μl
0.2 M EDTA溶液	40μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂，用户需自备相关试剂。

二：双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中，按下表设置cDNA合成反应：

成分	用量
自备mRNA样品	4μl(0.5-2μg)
Oligo dT引物	1μL
70℃ 2分钟后室温放置2分钟，短暂离心
cDNA 第一链合成缓冲液	4μL
MMLV 逆转录酶	1μL
轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA
超纯水	48μL
cDNA 第二链合成缓冲液	16μL
cDNA 第二链合成酶混合液	4μL
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μL
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μL

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。


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·30mL亲和层析柱
编号：BTN140652
英文名称：Affinity Chromatography Colum(30mL)
规格：30mL
本产品适用范围广泛，可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子；还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等)，通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。

亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法，其示意图如下：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

常用亲和标签及纯化方案：

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