虾碱性磷酸酶(SAP)品牌

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虾碱性磷酸酶(SAP)品牌是高品质的工具酶产品，由北京百奥莱博供应，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多虾碱性磷酸酶(SAP)等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：虾碱性磷酸酶(SAP)品牌
编号：BTN120403
规格：300U
英文名：Shrimp Alkaline Phosphatase
品牌：百奥莱博
产地：北京
虾碱性磷酸酶与大肠杆菌来源的碱性磷酸酶同样，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，也能催化ATP等焦磷酸键水解。但该酶与大肠杆菌来源的BAP以及小牛肠来源的CIAP 不同，通过65℃，15分钟的热处理，可使酶完全不可逆失活。

产品用途：
1．去除DNA片段的5´-末端的磷酸基。防止线状DNA的自身环化(Self-Ligation)。
2．除去PCR反应后残存的dNTP。PCR产物进行测序时，在反应体系中如果有多余的Primer和dNTP，将影响测序反应的正常进行。使用Exonuclease I分解残存的Primer；用SAP处理可降解多余的dNTP，之后不需要对PCR产物进行精制，立即可以进行测序反应。

产品组成：

 

成分	规格
虾碱性磷酸酶(1U/μL)	300U
10×Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：

1．5U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．5U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化

使用举例：
1．在1.5mL离心管中配制下列反应液，定容至50μL。

成分	用量
DNA Fragment	1～10pmol
SAP(1～5μL)	1～5U
10×Buffer	5μL
dH2O	up to 50μL

2．37℃反应15～30分钟。
3．65℃反应15分钟(加热失活)。
4．加入2.5μL的3M NaCl(终浓度150mM)。
5．乙醇沉淀加入125μL(2.5倍量)的预冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟，离心。
6．加入200μl的70％冷乙醇清洗沉淀后，干燥。
7．TE Buffer(<20μL)溶解沉淀。


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·T4噬菌体基因32蛋白
编号：BTN130663
英文名称：T4 Gene 32 Protein
规格：100μg
T4噬菌体基因32编码蛋白是一种单链DNA(ssDNA)结合蛋白，为T4噬菌体DNA复制和修复所必需(1)。它协调性地结合并稳定瞬时形成的ssDNA区域，在T4噬菌体DNA复制过程中起着重要的结构性作用(2)。该蛋白也被广泛地用于稳定和标记ssDNA区域，以便用电子显微镜观察细胞内DNA的结构。

产品特点：
1．在RT-PCR过程中，增加反转录的产量和延伸能力；
2．土壤样品进行PCR时，增加目的片段的产量和特异性；
3．稳定和标记ssDNA结构。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

·末端脱氧核苷转移酶(TdT酶)
编号：BTN120312
英文名称：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
规格：500U
末端脱氧核苷转移酶 TdT是一种模板非依赖型DNA聚合酶，催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3´-OH重复添加脱氧核糖核苷酸。TdT反应需要含有至少3个碱基的短序列作为引物。以RNA为模板时，TdT性能严格依赖于受体RNA 3´-末端的三级结构和核苷酸的种类。总的来说，TdT对RNA模板的作用效率比DNA模板低。

产品特点：
1．通过Okayama-Berg法给载体或cDNA加上互补同聚尾。
2．线性双链DNA的各类3´-OH末端同聚物加尾。
3．本寡聚脱氧核苷酸和DNA标记。
4．5´-RACE(快速扩增cDNA末端)。
5．凋亡反应的原位定位。

产品组成：

成份	规格
末端脱氧核苷转移酶	25μL(20U/μL)
5×反应 Buffer	0.4mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。

使用方法：
1．建议按照下表添加如下反应成分
DNA 3´端加尾反应(20μL体系)：

5×反应Buffer	4μL
DNA片段	1pmol of 3´-ends
dATP or dTTP或dGTP or dCTP	130pmol或60pmol
末端脱氧核苷转移酶	1.5μl(30U)
补超纯水到	20μL

DNA 3´端加尾标记反应(50μL体系)：

5×反应Buffer	10μL
线性DNA	10pmol
标记的核苷酸(约10TBq/mmol)	1.85MBq
末端脱氧核苷转移酶	2μl(40U)
补超纯水到	50μL

2．37℃反应15 min。
3．70℃加热10分钟或添加2μL的0.5M EDTA溶液灭活酶，终止反应。


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·5-*-4-*-3-吲哚磷酸(BCIP)
编号：BTN100831
英文名称：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate
规格：100mg
BCIP分子式为C8H4BrClNO4P·C7H9N，分子量为433.64，CAS号为6578-06-9。本产品为白色结晶，溶解度为20mg/mL。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。NBT/BCIP用于蛋白印迹和免疫组化染色等实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·改良Lowry法蛋白定量试剂盒
编号：BTN101102
英文名称：Enhanced Lowry Assay Kit
规格：1000次
 Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应，可用于测定蛋白质浓度，但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤，即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物，再使其与Folin酚试剂发生显色反应，产物在750nm检测。
 Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来，灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右，是双缩脲反应的200倍，因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰，步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
 Lowry检测原理图如下：


产品特点：
1．即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2．能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3．检测线性范围广，在2-100μg，检测上限比经典Lowry法高30%-40%。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A成分一	208ml
溶液A成分二	16ml
溶液A成分三	16ml
溶液B	80ml
溶液C	80ml
福林酚	10mL(用100mL 棕色瓶)
BSA标准品(2mg/mL in水)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、准备工作
1．制备溶液A：将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中，混合均匀得到240mL溶液A。注意：溶液A各成分分开提供更加稳定。
2．制备 Lowry工作液：将溶液A、溶液B和溶液C按3：1：1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周，所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀，需37℃溶解并摇匀后再使用。
3．制备福林酚工作液：在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水，摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。

二、试管法
4．先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL，然后在标记的试管中加入下列成分(单位：μL)。注意：每个样品最好做三个稀释度，每个稀释度最好设置三次重复，阴性对照和标准品也最好做三次重复。

标准品(每个做三次重复，此处只列出一个)
编号	BSA 标准(50μg/mL)	水	总体积
阴性对照	0	0	200
1	0	200	200
2	25	175	200
3	50	150	200
4	100	100	200
5	150	50	200
6	200	0	200

 

样品(以1个样品、3个稀释度为例，每个稀释度三个重复，此处只列出一个)
编号	样品	总体积
1	200(稀释度1)	200
阴性对照1	200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200
2	200(稀释度2)	200
阴性对照2	200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200
3	200(稀释度3)	200
阴性对照3	200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液)	200

5．每管中加入200μl Lowry工作液，振荡混匀后室温反应10分钟。
6．每管中加入100μl 福林酚工作液，振荡混匀后室温反应30分钟。
7．用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时，先空白(即阴性对照)后样品，测定样品和BSA标准品时，先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净，必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8．根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线，然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。

三、96微孔板法
9．同上，只是反应用96 微孔板设置，用酶标测试仪750nm 测定光吸收。

四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品，如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表)，可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除，也可以用自备试剂按下法去除：用水将样品调到体积为200μl，加入20μl 0.15%去氧胆酸*，混匀，室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA，室温放置5分钟。3000 g离心15分钟，小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附：常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰，高于所列浓度则会干扰，需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE，DTT和硫*(代"酸")胺)。

干扰物	浓度	干扰物	浓度
Acetone	10%	2-Mercaptoethanol	1mM
Aprotinin	10mg/mL	NaCl	1 M
CHAPS	0.05%	NaOH	100mM
DMF	10%	NaPi	100mM
DMSO	10%	NP40	0.02%
EDTA	1mM	PMSF	1mM
EGTA	1mM	SDS	1%
Ethanol	10%	Sodium Citrate	100mM
Glucose	100mM	Sucrose	7%
Glycin	100mM	Tris	10mM
HEPES	1mM	Trition X-100	0.03%
Imidazole	25mM	Tween 20	0.05%
Methanol	10%	Urea	3M

疑难解答：
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg～50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基，对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况，需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。


虾碱性磷酸酶(SAP)品牌关键词：虾碱性磷酸酶,SAP,虾碱性磷酸酶(SAP),Shrimp Alkaline Phosphatase,BTN120403


·长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉)
编号：BTN100912B
英文名称：Stable SDS-PAGE Running Buffer
规格：20L
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的缓冲液，加水定容后即可使用，简便快捷。

本产品分A、B两种型号。A型电泳液适合30 KD以上蛋白，B型电泳液适合2-30KD蛋白。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·考马斯亮蓝G-250
编号：BTN131123
英文名称：Coomassie Blue G-250
规格：10g
考马斯亮蓝G-250是考马斯亮蓝系列染料中的一种，G表示其干粉颜色是蓝色偏绿，250表示其纯度。其*盐的分子式是C47H48N3O7S2Na，分子量为854。在酸性条件下，染料的硫*(代"酸")基团能跟快速蛋白的碱性*基酸结合并发生管关光谱偏移(最大光吸收变成595nm)，并且结合量跟蛋白浓度成正比，故常用于Bradford法蛋白定量。考马斯亮蓝G-250比R-250多两个甲基基团，不能直接替换使用。



储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖)
编号：BTN120101
英文名称：Glutathione Agarose
规格：2mL
谷胱甘肽琼脂糖亲和基质是结合谷胱甘肽(GSH)的4％浓度的交联珠状琼脂糖基质，可用于结合和分离纯化带有谷胱甘肽硫转移酶(GST)等谷胱甘肽亲和性蛋白质分子，特别是重组表达的GST融合蛋白。可用于带有GST标签的重组蛋白的纯化和GST pull-down实验。

产品特点：
1．特异性高，不与非GST融合蛋白相结合。
2．高结合量，每毫升基质可结合5～10mg重组GST融合蛋白。
3．高度灵活，可填装任意品牌的柱子。

储存条件：低温运输，4℃保存(切勿冻结)，有效期一年。

北京百莱博科技有限公司专业生产工具酶产品，欢迎来电咨询选购虾碱性磷酸酶(SAP)品牌。