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- 百奥莱博
- SV1063-EYQ
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
101
- 英文名：
Heat sensitive phosphatase (AP)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
5KU|1KU|500U
特别提示：包括热敏磷酸酶(AP)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：热敏磷酸酶(AP)
英文名称：Heat sensitive phosphatase (AP)
产品货号：SV1063
产品规格：5KU|1KU|500U
特性:
DNA 和 RNA 的去磷酸化
防止克隆载体的自连
制备 5´ 末端标记模板
去除 PCR 产物中的 dNTP 和焦磷酸盐
概述:
热敏磷酸酶催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外，热敏磷酸酶水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。热敏磷酸酶在分子生物学研究中应用广泛，如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团，用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中，对线性载体去磷酸化，防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。热敏磷酸酶也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP 分析。热敏磷酸酶 在 70℃ 温育 5 分钟即可完全的、不可逆的失活，因此，在连接或末端标记之前，可以不用去除热敏磷酸酶。
来源:
克隆有 TAB5 AP 基因的 E. coli 菌株，该基因zuì初克隆于质粒 pNI 中，后来重新克隆于质粒 pEGTAB7-4.1 中。
反应条件:
1X 热敏磷酸酶反应缓冲液
[50 mM Bis Tris-bǐng烷 HCl，1 mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2（pH 6.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 5 分钟。
质保声明:
热敏磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟能使 1 μg 经 HindIII（产生 5´ 突出末端）、EcoRV（产生平齐末端）或 PstI（产生 5´ 凹陷末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化标准是指在自连接反应中能抑制 ＞ 95% 的 DNA 再环化（通过转化 E. coli 细胞来检测）。
浓度:
5,000 units/ml。
我公司销售的热敏磷酸酶(AP)质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验说明:DAB有致癌作用，故操作时应戴手套，尽量避免与皮肤接触，用后及时彻底冲洗，接触DAB的实验用品 最好经洗液浸泡24h后使用。可用于免疫组化和蛋白印迹实验 >>>碱性磷酸酶显色剂（ AP ）
RNA转录物能通过琼脂糖变性胶电泳检测其探针完整性。标记效果可通过抗DIG碱性磷酸酶直接检测，有两种方法可以选择。 方法一、用标准DIG测试条比较鉴定 使用测试条鉴定包括两个步骤：首先，将转录标记的RNA稀释成一系列的浓度，并点样到空白测试条上（对照测试条已用一系列浓度点样）；其次，将点样的备测试条与对照测试条一起进行免疫、显色反应，然后根据对照测试条计算备测样品的浓度。 1. 将转录反应物稀释成浓度约为1 μg/ml，即取前述转录标记物1 μl 加入99
进行杂合反应时所使用的探针若为放射性物质所标定者，杂合讯息可经由放射显影术 （autoradiography） 侦测出来；若为DIG所标定者，则需借助anti-DIG抗体与碱性去磷酸酶 （alkaline phosphatase, AP） 的conjugate,并利用碱性去磷酸酶的酵素活性转现杂合反应讯息。 目前常用来进行碱性去磷酸酶呈色反应的基质为NBT （nitroblue tetrazolium） 与BCIP （5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate
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