T4聚核苷酸激酶厂家

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百奥莱博专业生产销*(代"售")T4聚核苷酸激酶厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：T4聚核苷酸激酶厂家
编号：BTN120506
规格：250U
英文名：T4 Polynucleotide Kinase
品牌：百奥莱博
产地：北京
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。本产品还具有3´磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下：


产品用途：
1．DNA或RNA的末端标记，用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2．寡核苷酸5´末端的磷酸化，以便进行连接反应。
3．除去3´磷酸基团。

产品组成：

 

成分	规格
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	25μl
10×反应缓冲液	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1 单位指在37℃条件下，30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。

1×反应缓冲液：[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃)，10mM MgCl2，5mM DTT]，37℃温育。

热失活：65℃加热20分钟。

来源：重组E.coli菌株，克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。

自备试剂：0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-³²P或γ-³³P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。

使用方法：

一、DNA 5´末端标记：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5´末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的[γ-³²P或γ-³³P]-ATP(3000Ci/mmol)	50pmol
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶,10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。

二、DNA 5´末端磷酸化：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5´末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的0.1mM ATP	3μL
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。

欲咨询购买T4聚核苷酸激酶厂家，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)
编号：BTN130950
英文名称：Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10次

·一管式拭子DNA提取试剂盒
编号：BTN60501
英文名称：One-tube swab DNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒专门用于从口腔拭子中快速提取能够用于PCR的基因组DNA。也可以用于提取微量血液，精液，血斑/精斑等法医物证的DNA。

产品特点：
1.快速，整个操作过程只需要十分钟，在一个离心管中完成。
2. DNA样品可直接用于PCR反应。
3.样品可以在4℃长期保存。
4. 不需要使用任何有毒的试剂。
5. 性价比高。

试剂盒组成：

成分	规格
无菌拭子	100只
1.5mL离心管	100只
溶液A	50ml
溶液B	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存。有效期一年。

使用方法：
1. 将医用棉球拭子涂抹面颊的口腔内表面约十次，放入加有0.5mL溶液A的1.5mL塑料离心管中。
2. 剪去口腔拭子柄部，留药棉头于离心管中，盖上离心盖后振荡一分钟。
3. 95℃保温5分钟，用镊子取出离心管中药棉头，并在离心管壁尽量挤出其中的液体。
4. 加入50μl的溶液B，振荡半分钟。
5.室温12000 g离心2分钟。
6. 直接取上清作为模板加入到PCR反应体系中进行扩增，所加量以PCR的总体积的1/５为宜(即50μl的PCR 体系加10μl处理液)。
7. 剩余样品放4℃保存。

使用效果：

图注:用本产品提取涂抹面颊后的拭子的口腔上皮细胞DNA，最后分别取5μl(5号样)和10μl(10 号样)作为模板进行PCR,反应完后取10μl上样电泳。扩增片段为人-actin基因，长度为610bp，M表示100bp DNA Ladder，最大片段为600bp。电泳在SuperBuffer-2中进行，300 V，5分钟。

疑难解答：
Q：能否浓缩第六步上清中的DNA？
A：可以用盐/乙醇法浓缩DNA，用浓缩后的DNA做模板扩增效果更好。


T4聚核苷酸激酶厂家关键词：T4 Polynucleotide Kinase,T4聚核苷酸激酶,BTN120506

YT004 酵母质粒小量抽提试剂盒 Yeast Plasmid Mini Preparation Kit
BTN3130A 三合一RNA上样液(A型,6X) RNA Loading Buffer
SY0316 RIPA裂解液(中) RIPA Lysis Buffer (Medium)
SV0027 AgeI限制性内切酶 AgeI Restriction Endonuclease
KFS289 N-乙酰半胱*酸(抗氧化剂)(NAC) N-acetyl-L-cysteine
HR0113 真菌核蛋白提取试剂盒 Fungal Nuclear Protein Extraction Kit
YT907 青霉素-链霉素溶液(100X) Penicillin-Streptomycin Solution（100X）
BTN120310 T7 RNA聚合酶 T7 RNA Polymerase
HR0475 Caspase 3抑制剂 Caspase 3 inhibitors
SV1466 Turbo E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )
YT252 SP1凝胶迁移突变探针(10μM) SP1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
BTN120520 大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞 E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell
ALH157 细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒 Cells Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
SV0710 SpeI限制性内切酶 SpeI Restriction Endonuclease
WE0241 二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
BTN90314 柱式尿液DNA提取试剂盒 Urine DNA column extraction kit
SY0212 Elk1-GFP报告基因质粒 Elk1 GFP Reporter Plasmid
RFT062 1M Tris(pH6.8)
KFS186 Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
SY0425 V5 Tag多肽 V5 Tag Peptide
YT559 N-乙酰*基葡萄糖转移酶 N-Acetylglucosaminyltransferases (Crude Enzyme)
T4聚核苷酸激酶厂家关键词：T4 Polynucleotide Kinase,T4聚核苷酸激酶,BTN120506

SY0064 SP1萤火虫荧光素酶报告基因质粒 SP1 luciferase reporter plasmid
YT145 Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK) Caspase Inhibitor Z-VAD-FMK
BTN100839 PCR级甲酰胺 Formamide，PCR Grade
SV1612 pSNAP-tag(T7)-2 载体
SV0416 HinP1I限制性内切酶 HinP1I Restriction Endonuclease
WE0137 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 SuperSYBR One Step RT-qPCR Kit
BTN101121 软骨RNA柱式提取试剂盒 Cartilage RNA column Extraction Kit
SV0934 IsoAmp II 通用 tHDA 试剂盒
BTN121104 改良型天狼猩红染色试剂盒 Enhanced Sirius Red Straining Kit
KFS083 2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 2×SDS-PAGE loading buffer
SY0311 磷酸酶抑制剂混合物(100×) Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×)
SV0014 AclI限制性内切酶 AclI Restriction Endonuclease

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