1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂
编号：BTN101207
品牌：百奥莱博
规格：250mL
产地：国产|进口

除1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂外，我公司正在打折促销以下产品：

·AP标记的链霉亲和素
编号：BTN131022
英文名称：Streptavidin，AP Conjugated
规格：0.5mL
本产品为碱性磷酸酶(AP)标记的链霉亲和素，可用于检测生物素分子及生物素标记物质。此产品建议使用浓度：
➤ 免疫印迹：1:200～500
➤ 免疫组化：1:200～1000
➤ Immunocytocehmistry：1:200～1000
➤酶联免疫吸附试验：1:200～2000

储存条件：低温运输，4℃保存，请勿冷冻。有效期一年。

·核酸内切酶III(Nth)
编号：BTN130639
英文名称：Endonuclease III(Nth)
规格：1000U
核酸内切酶III(Nth)既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性，占E.coli AP酶总活性的90%。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶

(AP)位点。AP-裂解酶活性则切割AP位点的3´端，产生一个5´磷酸和一个3´磷酸-α,β不饱和醛。被核酸内切酶III识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6二羟基

胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二羟基胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

产品用途：
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数1:10⁴～1:10⁵；
➤ 碱性析出；
➤ 碱解旋。

产品组成：

 

成分	规格
核酸内切酶III(Nth)(10000 U/mL)	100μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：65℃20分钟。

活性定义：1单位指在10μl缓冲液体系中，37℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。



1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂关键词：百奥莱博,1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级),BTN101207
  我公司是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级)、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。



·DNA Shuffling试剂盒
编号：BTN131178
英文名称：DNA Shuffling Kit
规格：10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组，它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术，它以一个或多个基因为起始材料，通过先随机断裂成小片段，再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物)，最后再进行常规PCR(外加引物)等处理，最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下：


产品特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化，1-2天即可完成，节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

试剂盒组成：

成分	规格
PCR Mix 3.0，2×	1.5mL
DNase I溶液(1U/μL)	10μl
溶液A，10×	60μl
溶液B，10×	60μl
超纯水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限一年。

使用方法：
1.待突变基因片段的制备：待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb，同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段，则彼此的比例为1:1)，并且必须通过胶回收的方法回收，以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴，同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制，方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中，按顺序加入下列成分：

成分	用量
待突变基因片段(第1步制备)	2μg
溶液A	5μl
溶液B	5μL
DNase I工作液(第2步制备)	2μL
超纯水	36μL

4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟，然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳，用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意：一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围，最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA，否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR：

过程	温度	时间
PCR前变性	94℃	150s
PCR反应(40循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	10s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

9.取5-10μl进行电泳检测，然后进行PCR回收，得到第一轮PCR产物。
10.将回收的第一轮PCR产物1μl原液作为模板设置3管第二轮PCR反应。

成分	用量
回收的第一轮PCR产物	1μL
PCR Mix 3.0，2×	50μL
自备DNA Shuffling引物	各1μM
超纯水	加水到100μL

11.按下列PCR参数进行第二轮PCR。

过程	温度	时间
活化	94℃	150s
PCR反应(25次循环)	94℃	30s
	47.5℃	45s
	72℃	60s，每次循环后增加5s
PCR后延伸	72℃	10min

12.电泳检测，回收预期大小的PCR产物，用于后续的构建克隆文库实验(略)。

疑难解答：
Q：易错PCR和DNA Shuffling有何区别？
A：前者引入的是点突变，后者引入的是重组突变。示意图如下：



1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级) 生化试剂关键词：百奥莱博,1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级),BTN101207
  1M Tris-HCl(pH8.5)(DNA级)怎样保存？
一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂，如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂，应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当，就会失效变质，影响实验的效果，并造成物质的浪费，甚至有时还会发生事故。因此，科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行，获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。


ARB12932 小鼠对*基*甲*(代"酸")(PABA)定量分析 Mouse para-aminobenzoic acid,paba ELISA KIT
SJ0401 L-Valine  L-缬*酸
PY02-281  靛基质培养基  250克  
BL0296 HT(原装)
6160-80-1 4-MUG  4-甲基伞形酮-β-D-葡糖苷酸
BTN130966 水饱和正丁醇 Water Saturated Butanol
伊文斯蓝 DL-Glutamine 314-13-6
BTN131088 荧光素(FITC)标记亲和素 FITC-Avidin
硝酸益康唑 CTAB 24169-02-6
ARB12162 大鼠白介素27(IL-27)酶免分析 Rat interleukin 27,IL-27 ELISA KIT
ARB12097 大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)血清中含量检测 Rat terminal complement complex c5b-9,tcc c5b-9 ELISA KIT
PY02-005  麦康凯琼脂  250克  
ARB14177 人胃泌素17(G-17)检测服务 Human Gastrin17 (G-17) ELISA KIT
CYB167006 羊抗人IgA(α链特异)
ARB10861 人抗神经元核抗体2型/抗RI抗体(ANNA-2/RI)酶标法分析 Human neuronal nuclear autoantibody,anna-2/ri ELISA KIT
ARB14009 绵羊白介素1β(IL-1β)酶免分析 Sheep interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
ARB13224 小鼠脱*表雄酮(DHEA)代做ELISA实验 Mouse dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
PY02-107  酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)  250克  
去氧胆酸(猪) Protein protectant DP4 83-44-3

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