柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒厂家直销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒厂家直销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒厂家直销
编号：BTN120406
规格：15次
英文名：Plant Chloroplast DNA column extraction kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒是结合植物叶绿体纯化试剂盒和柱式植物DNA抽提试剂盒而推出的新兴产品,专门用于植物叶绿体DNA的快速提取。

试剂盒特点：
1. 纯度高,不含污染和抑制剂,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、 mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验,不会发生离心柱堵塞现象。
2.产率一般在1-2μg/1g叶片样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50Kb左右。
3. 本产品足够15次提取,每次可处理30g叶片。
4. 已经成功用于菠菜,大豆,莴笋,白菜,烟草和甜菜等双子叶植物,也适用于单子叶等其他植物(可能需要优化条件)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
叶绿体纯化匀浆液成分一	250mL×2
叶绿体纯化匀浆液成分二	3g
Percoll	60mL
带柄尼龙滤膜	1个
叶绿体DNA纯化溶液A	15mL
叶绿体DNA纯化溶液B	7.5mL
叶绿体DNA纯化溶液C	30mL
离心吸附柱	15套
通用洗柱液	15mL
DNA洗脱液2.0	10mL
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但匀浆液成分二长期保存时需要放4℃)，保存期限一年。

使用方法：
注意：叶绿体对温度高度敏感,所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行,所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行,离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能,提取还需要在昏暗的光线条件下进行。强烈建议用显微镜监控整个过程中叶绿体的回收情况。

一：叶绿体的纯化
1.实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成,否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净,再用蒸馏水淋洗,去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理,则保存时需要保持叶片湿润,即使如此,叶片的放置时间也不能超过一天。
2.计算实验所需叶绿体匀浆液的体积(下面简称匀浆液),本试剂盒一次实验可处理30 g叶片,对一般植物,每克叶片需要准备4mL匀浆液,则一次实验需要准备120mL匀浆液。对烟草和大豆,每克叶片需要6mL匀浆液,则一次实验需要准备180mL匀浆液。为了保险可以多配10%。
3.实验当天制备匀浆液。制备方法是：将自备的去离子水与试剂盒提供的匀浆液成分一在干净的玻璃或塑料容器中按4：1的比例混合,然后在每100mL混合液中加入匀浆液成分二干粉0.1g(终浓度为0.1%),轻柔搅拌10分钟后,所得溶液即为匀浆液。冰上预冷待用。匀浆液只能当天使用,不能放置。
4.预留1.5mL用于悬浮叶绿体,其余匀浆液转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中,再快速将新鲜植物叶片的叶脉去除,再将叶片剪成1-3cm2大小的碎片,浸泡在匀浆机里面的匀浆液中。
5.低速匀浆10秒,避免起泡沫。用玻璃棒把液面的叶碎片按入到匀浆机底部,再低速匀浆10秒。
 注意：还可用Dounce玻璃匀浆器,Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等匀浆,但它们单次处理量小,需分成很多份处理后再汇集,非常不方便。
6.用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液,用预冷的200mL量筒收集穿透液,再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的穿透液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜洗涤干净后可反复使用。
7.在水平转子离心机上4℃ 200g离心3分钟(对菠菜,白菜和莴笋材料)或400g离心1分钟(对甜菜材料),白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。其他植物材料则需要用户自己摸索最佳离心力。
8.将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
9.在水平转子离心机上4℃ 1000g离心7分钟,小心弃上清,沉淀含叶绿体。
10.在沉淀中加入1.5mL预冷的匀浆液,手弹离心管底部使叶绿体重悬。
 注意：重悬时最好避免溶液起泡,也不要用枪头吹打,否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象,但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
11.将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL),得到叶绿体粗提液。
12.如果对叶绿体DNA是否含细胞核DNA的要求不高,则叶绿体粗提液可以直接用于叶绿体DNA纯化,具体操作是在水平转子离心机上4℃ 1000g离心7分钟,小心弃上清,沉淀为叶绿体,直接用于DNA纯化(见步骤二)。
13.如果需要无细胞核DNA污染的叶绿体DNA,则按以下流程操作：在50mL塑料离心管中先加入6mL匀浆液成分一和4mL的Percoll,充分混合均匀得到40%的Percoll溶液,在其液面上小心铺上6mL的叶绿体粗提液,在水平转子离心机上4℃ 1700g离心6分钟,管底绿色沉淀为完整的叶绿体,液面的绿色部分为破碎的叶绿体。小心将上清去除后,直接将沉淀(完整叶绿体)用于叶绿体DNA纯化(见步骤二)。

二：叶绿体DNA的纯化(溶液A和溶液B容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,均需65℃溶解并摇匀后待用)
14.将600μL预热的溶液A加入到叶绿体沉淀中后充分吹打混匀。
15.加入300μL预热的溶液B,震荡混匀10-30秒。
 注意：溶液B非常粘稠,可以采取称量方法称取300mg(约等于300μL)使用或将1mL枪头剪去一截后再吸取300μL使用。
16.65℃放置3～5分钟。如果室温放置,DNA产量会降低10-20%。
17.加入200μL自备*仿,震荡混匀10-30秒。
18. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明,中间层有白膜。小心转移上清液(约0.8mL)到一个新的3-5mL离心管中,避免触及中间层的白膜,可留少量上清不取。
19.加入1.5倍体积(约1.2mL)的溶液C,颠倒混匀后先转移0.7mL到离心吸附柱中,室温放置至少2分钟。12000rpm室温离心1分钟,DNA将吸附在离心吸附柱的膜上,倒弃收集管中的穿透液。
20.再将剩余的溶液按上步方法上柱。
21.将0.5mL通用洗柱液加入到吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃穿透液。重复操作一次。空甩半分钟去除残留液体。
22.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加50-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置3～5分钟。
23.12000rpm室温离心1分钟即得植物叶绿体DNA溶液,直接取5-10μL电泳检测,其余放冰箱备用。

关于柱式植物叶绿体DNA提取试剂盒厂家直销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·液体样品RNA和DNA提取试剂盒
编号：BTN80929
英文名称：Liquid sample nucleic acids extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种微量和痕量样品中提取DNA和RNA的试剂盒。

试剂盒特点：
1. 核酸的回收率高，可以达到90%以上，可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2.一管式操作，减少了样品污染的可能。
3.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
4. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.可以处理各种形态的样品，包括液体样品，单个或少量的细胞，微小胚胎等等。
6.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
7. 试剂稳定，可以长期放置。

试剂盒组成：

成分	50T
溶液A	15ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
溶液D	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A和溶液D需要4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将不超过0.1mL的样品转移到自备的1.5mL 旋盖塑料离心管中。
2. 加入0.3mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
注意：溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.4mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。
注意：将离心管放入离心机时一定要将离心面向外。
8.小心移弃上清。
注意不要触及离心面管底的核酸沉淀。
9. 短暂离心数秒。
注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时管壁(离心面方向)上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液如果混浊或有少量不溶物是正常现象，不溶沉淀物中就裹含有核酸。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。


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·放线菌*(代"素")D
编号：BTN120680
英文名称：Actinomycin D Solution
规格：1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素；Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16，分子量：1255.41。可作为代谢抑制剂，细胞质膜研究。它能抑制RNA的合成，作用于mRNA，干扰细胞的转录过程，阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。

抗性机制：放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构，通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用，使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中，与DNA形成复合体，阻碍RNA多聚酶的功能，抑制RNA的合成，特别是mRNA的合成。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·长效期SDS-PAGE电泳液(＞30 KD)(干粉)
编号：BTN100912A
英文名称：Stable SDS-PAGE Running Buffer
规格：20L
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的缓冲液，加水定容后即可使用，简便快捷。

本产品分A、B两种型号。A型电泳液适合30 KD以上蛋白，B型电泳液适合2-30KD蛋白。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。


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KFS014 甘油明胶封片液 Glycerol Jelly Mounting Medium
WE0269 GST琼脂糖凝胶 Glutathione-Sepharose Resin
SV0793 Nt.BstNBI切刻内切酶 Nt.BstNBI切刻内切酶
SY0607 嘌呤霉素盐*(代"酸")盐 Puromycin Dihydrochloride
KFS359 超微量ATP酶测试盒(测Ca2+ATPase)
YT280 总NOS抑制剂(L-NMMA)(一氧化*(代"氮")合成酶抑制剂) Total NOS Inhibitor(L-NMMA)
SV1509 α2-3 神经*酸苷酶
BTN160802 丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(49.5%T,3%C)
BTN130855 T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) T4 RNA Ligase 2
YT936 20S蛋白酶体抑制剂(MLN9708) 20S proteasome Inhibitor
HR0169 细菌总蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Total bacterial protein extraction kit (2D electrophoresis)
BTN130529 真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for Yeast
SV0108 BccI限制性内切酶 BccI Restriction Endonuclease
SY0344 30%丙*(代"烯")酰胺/甲叉双丙*(代"烯")酰胺，37.5:1 30% Acryl/Bis Solution, 37.5:1
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YT034 蛋白浓度测定试剂盒(Bradford法) Bradford Protein Assay Kit
SV0998 phi29 DNA 聚合酶反应缓冲液

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