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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
308
- 英文名:
Single Spore Whole Genome Amplification Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存,有效期一年。使用方法:一、破碎真菌孢子细胞壁1. 将单个孢子转入2.5μl裂解液中,并且在显微镜下用微型针刺破细胞壁,90℃保温10分钟。2. 加入5μl WGA溶液A和2.5μL超纯水,即可直接用于WGA。二、WGA反应1.在上步得到的10μl破碎了细胞壁的孢子样品中(已经加入了5μL WGA溶液A),加入10μL WGA溶液B,轻柔吹打混合均匀。2. 加入0.5μl Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50μl石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。4. 65℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")单孢子全基因组扩增试剂盒价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:单孢子全基因组扩增试剂盒价格
编号:BTN100942
规格:30次
英文名:Single Spore Whole Genome Amplification Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品是用于从单个真菌孢子中扩增全基因组的试剂盒(此产品需自行分离单孢子)。
产品特点:
1.可以直接用孢子进行全基因扩增,避免了提取孢子DNA 过程中的样品损失。
2. 即开即用,不需要单独准备所需试剂。
3.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力,具有高保真高产量的特点,可以扩增单个孢子基因组达上万倍。
4.适用于各种真菌孢子样品。
5.产物可用于多种后续试验,包括酶切、克隆、文库构建、测序、基因芯片分析等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 裂解液 | 75μl |
| WGA溶液A | 150μl |
| WGA溶液B | 300μl |
| Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、破碎真菌孢子细胞壁
1. 将单个孢子转入2.5μl裂解液中,并且在显微镜下用微型针刺破细胞壁,90℃保温10分钟。
2. 加入5μl WGA溶液A和2.5μL超纯水,即可直接用于WGA。
二、WGA反应
1.在上步得到的10μl破碎了细胞壁的孢子样品中(已经加入了5μL WGA溶液A),加入10μL WGA溶液B,轻柔吹打混合均匀。
2. 加入0.5μl Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
3. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50μl石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
4. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
5. 立即取3-5μl WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意:WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料,所以需要先加上样缓冲液。
6.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。
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·热敏磷酸酶
编号:BTN130655
英文名称:Antarctic Phosphatase
规格:500U
本产品是从南极微生物中克隆并在大肠杆菌中表达的热敏磷酸酶,它能催化除去DNA或RNA末端的5´磷酸基团。由于磷酸酶处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
产品特点:
1.除去DNA、RNA、rNTPs和dNTPs 5´末端的磷酸基团
2.防止克隆载体的自连接
3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化
4.为5´末端标记准备模板
5.去除PCR产物中的dNTP和焦磷酸盐
6.65℃加热5分钟可使酶完全失活
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在37℃条件下,30分钟能使1μg经HindIII(产生5´突出末端)、EcoRV(产生平齐末端)或PstI(产生5´凹陷末端)消化的pUC19 DNA去磷酸化所需的酶量。
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