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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
437
- 英文名:
DNAgreen, PCR Grade
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、-20℃避光
- 规格:
0.1mL
特别提示:包括PCR级绿如蓝DNA染料在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PCR级绿如蓝DNA染料
英文名称:DNAgreen, PCR Grade
产品货号:BTN70909
产品规格:0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。
产品特点:
1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。
储存条件:常温运输、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
| 试剂 | 加入量 |
| 10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
| MgCl2 50mM | 2.5μl |
| dNTP 10mM | 1μl |
| 本产品(PCR级绿如蓝染料) | 2.5μl |
| Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
| DNA模板 | 适量 |
| PCR引物 | 5-50 pmol each |
| 补水到 | 50μl |
2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR,并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。
注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时,最好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶,可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。
我公司销售的PCR级绿如蓝DNA染料报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验经验分享|动物活体光学成像实验——荧光成像(四)【染料推荐】
散射事件。这将会导致在荧光图像中出现信号模糊的情况,这种情况对于远离激发光源和探测器(CCD)的荧光目标会被放大。散射的另一个重要结果是,它放大了组织荧光团的波长变化,导致检测到的荧光光谱的形状和峰值位置根据组织中光所走过的路径长度而变化。 组织吸收: 组织内的微观成分从小分子(糖、脂肪酸、氨基酸、核苷酸、离子、水等)和大分子(蛋白质、磷脂、RNA、DNA、多糖等)到更大的结构(如细胞器和细胞膜等)通过可见光波长范围(400-700 nm)时,因为组织成分在这个波长范围内的吸收限制,削弱了有效
建议提问前先搜索相关版面 一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞
,最好在4℃条件下电泳。 (5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。 (6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶,电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化。 对于天然的双链,常用的几种电泳缓冲液有TAE
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