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685
- 英文名:
Poly (U) Polymerase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货Poly(U)聚合酶怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货Poly(U)聚合酶怎么卖
规格:60U
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Poly (U) Polymerase
Poly(U)聚合酶催化UTP或ATP转化的UMP或AMP添加到RNA 3´端,该反应不依赖模板的存在。
产品特点:
1.用UTP标记RNA
2.为RNA添加 poly(U)尾,用于克隆
3.研究 poly(U)加尾对转染至真核细胞的RNA在稳定性和翻译上的影响
4.2" O-甲基的3´修饰末端添加poly(A)尾
5.无DNase、RNase和磷酸酶污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
我公司的北京现货Poly(U)聚合酶怎么卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
2869-83-2 Janus Green B 詹纳斯绿B
ARB11369 人前列腺素D合成酶(PTGDS)Elisa方法检测 Human prostaglandin d synthase,ptgds ELISA KIT
SJ0672 吉姆萨染色液
*百里酚蓝*盐 Dopamine hydrochloride 34722-90-2
CYB164041 BSA-HRP
BTN81214 Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉) Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer
ARB11301 人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)Elisa定量检测 Human noradrenaline bitartas,ne-b ELISA KIT
无机焦磷酸化酶 Sorbic acid 9024-82-2
BTN80816 超敏型BCA法蛋白定量试剂盒 Micro BCA Protein Assay Kit
ARB13178 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)elisa检测 Mouse oxidizided glutathione,gssg ELISA KIT
BL0830 HRP标记兔抗FITC抗体
ARB10976 人免疫球蛋白G3(IgG3)检测服务 Human lmmunoglobulin g3,igg3ELISA KIT
PY02-046 葡萄糖肉汤 250克
碘化* Phthalide 7681-11-0
F030506 FITC标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*FITC
BTN60302 硫*(代"酸")卡那霉素干粉 Kanamycin Sulfate Powder
BL0902 FITC标记羊抗猪IgG抗体
麦芽糖一水合物 Methyl orange 6363-53-7
ARB10030 人8异前列腺素(8-Iso-PG)elisa检测操作说明书 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-pg ELISA KIT
2,2-二羟甲基丁酸 2,6-Dimethylphenol 10097-02-6
L-甘-甘-白三肽 BHA 14857-82-0
北京现货Poly(U)聚合酶怎么卖关键词:Poly (U) Polymerase,BTN130620,Poly(U)聚合酶
·无内毒素质粒DNA大量提取试剂盒
编号:BTN81107
英文名称:Endotoxin-free plasmid DNA large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是整合大提质粒DNA提取试剂盒和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我司独家推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。
试剂盒特点:
1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取试剂盒低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 菌体内毒素清除剂 | 200ml |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 35ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 300μl |
| 吸附柱活化液 | 12.5ml |
| 大提离心吸附柱 | 5套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:RNase A溶液需4℃或-20℃保存,其余成分可室温保存,如有沉淀可加热溶解后再使用。
使用方法:
1. 用50mL塑料离心管收集不超过40mL的E.coli 饱和菌液,5000rpm离心5-10分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入10mL菌体内毒素清除剂,温和混匀后5000rpm离心5-10分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 重复上述操作3次,得到的菌体将丢失了绝大部分细胞表面的内毒素。
4. 往细菌沉淀中加入5mL溶液A(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入并混合均匀,未用完的部分放4℃保存),充分振荡悬浮。注意:充分重悬细胞沉淀(无块状物)对于获得高的质粒产量十分重要。
5. 加5mL溶液B,温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明,应减少细菌的用量或室温放臵5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡,否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段,与质粒难以分离,污染质粒DNA。
6. 加入冰浴的7mL溶液C,颠倒混匀,冰上放臵10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
7.在等待期间,活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入2.5mL活化液,套上收集管后室温放臵2分钟,然后5000rpm离心2分钟,倒弃穿透液,再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果不活化,质粒得率将低20-40%左右。
8. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强,离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
9. 将上步得到的上清液移入到大提离心吸附柱中,放入50mL收集管中。室温放臵5分钟左右以便让质粒DNA跟膜结合。
10. 6000rpm离心5分钟,质粒DNA 将与大提离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
11. 将10mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,弃穿透液。
12. 重复上步一次。
13.室温6000rpm 空甩5分钟,弃穿透液。注意:此步很重要,不能跳过,否则残留乙醇会影响后续实验。
14. 将大提离心吸附柱放入一个干净的50mL塑料离心管中,加0.5mL DNA洗脱液3.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳),室温静臵2分钟后6000rpm离心5分钟,收集液即是质粒DNA溶液。
15. 重复上步3-4次可洗脱更多的质粒DNA。DNA 洗脱液3.0 不够可以用TE或超纯水替代。
16. 合并所得质粒DNA,立即使用或-20℃储存。
注意事项:
1.细菌培养时间一般为12-16小时,但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2.注意溶液A:溶液B:溶液C的比例为5:5:7。若细菌量增大,需按比例放大这些溶液的使用量。
3.随菌体增多应延长溶液B的作用时间,直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4.加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片,离心后应避免带入到后续处理中。
5.通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次,否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6.质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。一般1.5mL 过夜培养菌体可收获约10μg高拷贝质粒。
7.纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常,未分开的环套质粒,易被误判为基因组DNA。
北京现货Poly(U)聚合酶怎么卖关键词:Poly (U) Polymerase,BTN130620,Poly(U)聚合酶
·自诱导培养基(lac启动子)
编号:BTN100825
英文名称:Auto-induction Medium
规格:200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 成分A | 200ml |
| 成分B | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一、培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二、培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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文献和实验外大量扩增。 PCR扩增酶及其浓度 目前有两种聚合酶供应,一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶,另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化典型的PCR反应约需酶量2.5 U(指总反应体积为100 μl时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。 PCR扩增时dNTP的质量与浓度 dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系,dNTP粉呈颗粒状,如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性,使用时应配成高浓度后,以1 M NaOH或1 M Tris HCL的缓冲液将其PH
往往形成茎环结构,其后又有一串寡聚U。茎环结构可使因子聚合酶变构而不再前移,寡聚U则有利于RNA不再依附DNA模板链而脱出。因此无论哪一种转录终止都有RNA聚合酶停顿和RNA产物脱出这两个必要过程。真核生物转录终止是和加尾(mRNA的聚腺昔酸poly A)修饰同步进行的。RNA上的加尾修饰点结构特征是有AAAUAA序列。 基本概念: 1.转录起始前复合物 (pre-initiation complex,PIC):是真核生物转录因子与RNA聚合酶一同结合于转录起始前的DNA
合成是以DNA的一条链为模板而进行的,所以这种转录方式又叫做不对称转录。②都以四种三磷酸核苷的底物,原料;③都遵循DNA与RNA之间的碱基配对原由,A=U,T=A,C=G,合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性,所以没有校正功能。 RNA聚合酶催化下列反应: 大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的,这是一个分子量达50多万,全酶由五咱亚基组成,去掉δ
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