氯霉素干粉厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的*霉素干粉厂家用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多*霉素干粉等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：*霉素干粉厂家
编号：BTN60102
规格：1g
英文名：Chloramphenicol Powder
品牌：百奥莱博
产地：北京
*霉素是白色至微黄色针状结晶或片状结晶。分子式为C11H12Cl2N2O5，分子量为323.13。真空时升华。无臭,味苦。易溶于醇类,微溶于乙*(代"醚"),不溶于*、石油醚和植物油。水溶液呈中性。熔点150.5～151.5℃。在干燥时稳定，在弱酸性和中性溶液中较安定，煮沸也不见分解，遇碱类易失效。

结构式：


储存条件：常温运输、4℃保存、有效期一年。

更多有关*霉素干粉厂家的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·EDTA溶液(0.5M,pH8.0)(DNA级)
编号：BTN100842
规格：250mL

·胃蛋白酶抑制剂溶液(1mg/mL)
编号：BTN100835
英文名称：Pepstatin Solution
规格：1mL
木瓜蛋白酶抑制剂可以抑制木瓜蛋白酶(papain)、胰蛋白酶(trypsin)和血浆酶(plasmin)等蛋白酶活性，抑制能力是弹性蛋白酶抑制剂的100倍。木瓜蛋白酶抑制剂的分子量为677.63，易溶于水。本产品为木瓜蛋白酶抑制剂水溶液，浓度为0.5mg/mL，工作浓度为50μg/mL。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

使用方法：
 将本产品加到各种裂解液中，使其终浓度为50μg/mL 即可。含有本产品的水溶液或缓冲液在2-8℃下可以稳定1周，-20℃条件下大约可稳定1个月。注意避免将产品反复冻融。低浓度的本产品稀释液应置于冰上，且只能保存1天。
 具体使用含本产品的裂解液的方法，根据裂解液的不同而不同，本说明书无法提供详细流程。


*霉素干粉厂家关键词：Chloramphenicol Powder,BTN60102,*霉素干粉


·Methacarn固定液
编号：BTN131291
英文名称：Methacarn Fixative Solution
规格：250mL
本产品为甲醇、*仿、乙酸等混合固定液。Methacarn固定液对核内抗原的保存效果较好，适用于某些抗原、癌基因蛋白产物检测的固定。固定时间应根据组织块大小确定，一般室温固定4-24小时。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期半年。

·5M异硫*酸胍溶液(RNase-free)
编号：BTN100883
英文名称：Methacarn Fixative Solution
规格：250mL
本产品为甲醇、*仿、乙酸等混合固定液。Methacarn固定液对核内抗原的保存效果较好，适用于某些抗原、癌基因蛋白产物检测的固定。固定时间应根据组织块大小确定，一般室温固定4-24小时。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期半年。

·ECD-G固定液
编号：BTN131294
英文名称：ECD-G Fixative Solution
规格：250mL
本产品为碳二亚酰胺、戊二醛等组成的混合固定液。常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD(1-(3-二甲*基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐*(代"酸")盐)单独应用时，边缘固定效应重，但与戊二醛、Tris及PB联合应用，效果明显改善，细胞质仍可渗透，利用细胞中抗原的定位，超微结构保存较好。ECD-G固定液是一种用于培养细胞电镜水平免疫细胞化学研究的很好的固定剂。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·1M Tris-HCl(pH9.0)(DNA级)
编号：BTN101208
英文名称：ECD-G Fixative Solution
规格：250mL
本产品为碳二亚酰胺、戊二醛等组成的混合固定液。常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD(1-(3-二甲*基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐*(代"酸")盐)单独应用时，边缘固定效应重，但与戊二醛、Tris及PB联合应用，效果明显改善，细胞质仍可渗透，利用细胞中抗原的定位，超微结构保存较好。ECD-G固定液是一种用于培养细胞电镜水平免疫细胞化学研究的很好的固定剂。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

·大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞
编号：BTN121004
英文名称：E.coli Rosetta(DE3) Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。本感受态细胞适用于真核蛋白表达，具有*霉素抗性。

菌株基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)pRARE(argU，argW,ileX，glyT，leuW，proL)(CmR)

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·可调式易错PCR试剂盒
编号：BTN160903
英文名称：Controlled Error-prone PCR Kit
规格：100次
易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性，在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法，则可从构建的突变库选出所需突变体。易错PCR和常规PCR的比较如下：


产品特点：
1. 即开即用，十分简单方便，尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化，实验人员在一定范围内可以控制突变率，一轮PCR的突变率范围在2-8突变/1000bp，更高的突变率可以通过多轮PCR达到。
3.可用于连续易错PCR，只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可，使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
4.可以扩增的DNA片段更长，达到3kb，对于3kb以上的产物，建议分段扩增。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	100μl
易错PCR专用dNTP 2.0,10×	300μl
易错PCR Mix 2.0,10×	300μl
易错PCR专用MnCl2	300μl
易错PCR专用dGTP	300μl
超纯水	1ml

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为一年。

使用方法：

1. 将模板DNA稀释到1ng/uL。将引物稀释到10uM。
 注意：引物是决定易错PCR成败的关键因素，设计引物时要保证其Tm在70℃，长度在25-30nt之间，GC含量在45%-60%之间，3端GC含量低，并且没有发夹结构。
2. 根据每1000bp的预期突变数按下表确定易错PCR的反应条件中MnCl2和dGTP的用量。表中的A表示易错PCR专用的MnCl2，B表示易错PCR专用的dGTP：

预期突变数	2个	3个	4个	5个	6个	7个	8个
A的用量(μl)	0	1.0	2.5	4.0	4.0	4.0	4.0
B的用量(μl)	0	0	0	1.0	2.0	3.0	4.0

3.以30μL的标准PCR反应体系为例，如果反应体系不是30μL，各成分需要按等比例增加或减少。在一干净的PCR管中，加入下列成分
 注意：可以先计算出超纯水的用量，优先加水

成分	用量
超纯水	根据第2步加
易错PCR Mix,10×	3μl
易错PCR 专用dNTP，10×	3μl
易错PCR 专用MnCl2	根据上步
易错PCR 专用dGTP	根据上步
自备DNA模板(1ng/μl)	1μl
自备PCR引物(10μM each)	1μl each
Taq DNA聚合酶(5U/μl)	1μl

4. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表)，然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件，一般可以先尝试下面的PCR条件(对1Kb长的模板而言)：

PCR前变性	94℃ 3分钟
易错PCR(循环30次)	94℃ 1分钟
	45℃ 1分钟
	72℃ 1分钟

注：易错PCR一般不需要热启动，也不需要在PCR结束后做延伸处理。长度每增
加1Kb，时间延长1分钟。易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率，进而决定每个PCR产物可能的突变位点数，所以所需循环数由客户根据需要改动。
5.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
6. 克隆片段进行功能筛选、或者克隆后进行测序分析突变率、或者用此轮PCR的产物为模板，进行下一轮的易错PCR。

疑难解答：
Q：现象：没有PCR产物。
A：可能原因：一是引物没有优化，可以重新设计引物；二是模板DNA太少，可以增加用量；三是模板不纯，最好先胶回收；四是溶解DNA的溶液中有EDTA，降低了PCR反应体系的Mg离子浓度，可以适当补加Mg离子。
Q：现象：太多的PCR条带或PCR条带模糊一片。
A：可能原因：一是PCR循环数太多；二是复性温度太低；三是延伸时间太长；四是引物没有优化，可以重新设计引物；五是PCR条件没优化，可以使用touch-down PCR；六是模板有其他DNA污染；七是DNA模板质量不高或者浓度太高。
Q：如果需要更高的突变率，如何办？
A：可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮易错PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板，否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板，但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。

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