易用培养瓶，75cm2，过滤

星型胶质细胞原代培养

，种植于75cm 2 培养瓶，经1小时差速黏附去除成纤维细胞后，将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养，两天换液一次。 7天后将培养瓶放入水平摇床，260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞，放入培养箱平衡1小时，重新置于水平摇床，260rpms 18小时37℃，换液弃除少突胶质细胞，用新鲜培养基洗2遍，加入0.25%胰蛋白酶与0.02% EDTA1：1混合液消化、传代备用。

快速掌握无菌操作

商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌，但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作，避免污染。请始终使用适当的灭菌方法（如高压灭菌器、除菌过滤器）对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免

致癌化学物转化细胞：转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验

1．取材：妊娠后第13天取材，取数个同窝胚胎，去头和内脏，在无菌条件下剪碎至米粒大小，再用0.25％胰 蛋白酶 （含0.01％EDTA）37℃消化30分钟，滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入75cm/培养瓶中，接种密度10～20×106/75cm，37℃培养2～3天，在顺利情况下能迅速长满瓶面。 2．贮存：选大批生长状态良好的细胞冻存，储以备用。 3．致癌物处理：取冻存细胞，解冻，接种于25ml培养瓶中，每瓶含细胞10万～30万