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嵘崴达
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见说明书
- 英文名:
CholesterolOxidase,Nocardia erythropolis
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见说明书
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大量
from Nocardia erythropolis, lyophilizate 10 129 054 103
Oxidoreductase that catalyzes the interconversion of cholesterol to cholest-4-
en-3-one.
Application
Use Cholesterol Oxidase in diagnostic tests for the determination of choles-
terol in combination with Cholesterol Esterase, Catalog Nos. 10 129 046 103, 10
262 609 103, 11 015 923 103, 11 520 857 103 or 11 641 735 103.
Benefits
Rely on the proven diagnostic quality of this product.
EC 1.1.3.6
Properties
Nomenclature: Cholesterol:oxygen oxidoreductase
Molecular weight: ~59 kD
Isoelectric point: 4.85
Michaelis constants (Cholesterol):
Phosphate buffer, pH 7.0: 1 x 10 -6 mol/l
Triton X-100/isopropanol, pH 7.0: 7 x 10 -6 mol/l
Inhibitors: ZnCl 2 , Brij 35, Tween 40, Tween 60, Hg 2+ , GSH, sodium dodecyl
sulfate,
laurylbenzenesulfonate
Activators: Hydroxypolyethoxydodecane, Triton X-100, DOC
pH optimum: 7.0-8.0 (see figure)
Temperature dependence: See figure
pH stability: 5.5-6.5 (see figure)
Thermal stability: Up to +50°C (see figure)
Specificity: Cholesterol (100%), b-cholestanol, pregnenolone, b-sitosterol and
stigmasterol react as substrates (65-70%). Dehydroisoandrosterone and ergos-
terol show 5% relative activity. Androsterone, testosterone, β-estradiol, vitamin
D3, cholic acid and cholesterol acetate do not react.
Specification
Appearance: Yellow-brown lyophilizate
Solubility: Clear, yellowish solution in water (c=10 mg/ml)
pH value (c=10 mg/ml in water): 5.5-6.5
Activity (+25°C, cholesterol): ≥2.5 U/mg lyophilizate
Protein (Lowry): 0.05-0.12 mg/mg lyophilizate
Contaminants (expressed as percentage of Cholesterol Oxidase activity):
Catalase: ≤6.0
Cholesterol esterase: No limit
Glucose oxidase: ≤0.01
"NADH oxidase": ≤0.01
Uricase: ≤0.01
Stability: At -15 to -25°C within specification range for 15 months. Store dry.
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文献和实验一、常用生化检测项目分析方法举例 1.终点法检测 常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法)、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、镁(二甲苯胺蓝法)等。以上项目中,除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外,其它测定项目 都可使
醇酯酶(cholesterolesterase,CHE)作用下水解成FC和FFA,FC再经胆固醇氧化酶(cholesteroloxidase,COD)氧化成△4胆甾烯酮和H2O2,再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量,或者△4胆甾烯酮生成量,以作为FC的定量依据。该法是目前常规应用方法,快速准确,标本用量少,便于自动生化分析器作批量测定。四、甘油三酯测定 甘油三酯又称中性脂肪,由于其甘油骨架上分别结合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸,所以分别存在有甘油三酯(TG)、甘油二酯(DG)和甘油一酯(MG)。血清中90%~95%
法)、UA(尿酸酶法)、a-HBDH、 TG、 Ca(偶氮胂III法)、 TC(CHOD- PAP)等均采用磷酸盐缓冲液,会干扰位于其后无机盐(P)的结果。 4. ALP(IFCC-AMP法),CK-NAC,CK-MB-NAC,TG(GPO法)试剂均含高浓度Mg2+会影响紧随其后的Mg2+的结果。 5. TC、HDL-C、HDL-C、LDL-C采用胆固醇氧化酶法的试剂含胆酸钠,会干扰紧跟其后的TBA结果,致假性偏高。 6. 以4NP
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