北京现货超敏化学发光底物(A液+B液)销售

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京现货超敏化学发光底物(A液+B液)销*(代"售")在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京现货超敏化学发光底物(A液+B液)销*(代"售")
产地：国产|进口
规格：1盒
品牌：百奥莱博
产品保存：4℃密封避光保存，一年有效
产品说明：Western blot 底物发光检测试剂是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用独特的发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通 ECL 试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对×光胶片曝光，也可直接进行 lμminometer 检测或者荧光 CCD 扫描。
产品特点：
1．高信噪比，背景低。
2．发光迅速。
3．可在日光灯下进行发光操作。
4．灵敏度高：可检测 femto 级抗原。
5．发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复 Western blot。
6．节约抗体，包括一抗二抗。超敏化学发光检测试剂因灵敏度高，可使用较高抗体稀释比例。一抗稀释 1:1000-1:5000 或 0.2-1.0μg/ml ；二抗稀释 1:20000-1:100000 或 10-50ng/ μl。
使用方法：
1．执行常规 SDS－PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。
2．膜的封闭:用 TBS-T 液洗涤印迹膜 10minX2。放入 5%脱脂奶粉封闭液内，摇床震动，室温封闭1小时。
3．一抗孵育：去除封闭液，并加入稀释好的一抗，用摇床震动，室温孵育2h 或 4℃孵育过夜。
注意：最好使用推荐的一抗稀释比例，稀释一抗使用封闭液稀释。
4．用 4-6倍 TBS-T洗涤印迹膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次数可降低背景。
注意：洗涤之前，用 TBS-T洗液将印迹膜进行简单的漂洗，将会增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：将一抗孵育后的印迹膜放入适当稀释的HRP 标记的二抗中孵育，摇床震动，室温孵育2 小时。
注意：最好使用推荐的HRP 标记二抗的稀释比例，稀释二抗使用封闭液稀释。
6．重复第 4 步，以去除非特异性 HRP 标记二抗的结合。
注意：与 HRP 标记二抗孵育后，必须彻底地清洗印迹膜。
7．制备工作液：按每 1 ml 蒸馏水加 A 液和 B 液各 50μι，混匀组成作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm2膜需要大约1ml工作液。
8．将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液。
9．将印迹膜与工作液孵育1-5min。
注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行胶片曝光。
10．将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡。
11．在暗室中取一张×胶片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分钟，立即显影定影。
注意：根据其发光的强度,缩短或延长×片的曝光时间(对微弱信号，曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。工

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·浓缩型免疫组化试剂盒 SABC-CY3(POD)(小鼠IgG)
编号：ZN1853
规格：1盒
产品规格：1KIT
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
工作原理
SABC 是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性，因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合，从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化，在 568-574nm 发射荧光，呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素(SABC-CY3+POD)，用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
试剂盒内容：
1．正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)1ml/2ml/5ml
2．生物素化山羊抗小鼠 IgG(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
3．SABC-Cy3(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
4．SABC-POD(参考效价 1：100)0.1ml/0.2ml/0.5ml
另有四个滴瓶供稀释试剂用。
石蜡片染色步骤：
1．石蜡切片，常规脱蜡至水。
2．3%H2O2 去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗,5分钟×3次。
3．根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4．封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5．滴加一抗(小鼠 IgG)，37℃孵育1-2 小时或 4℃过夜。PBS 冲洗，5分钟×3次。
6．滴加生物素化山羊抗小鼠 IgG，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
7．滴 加 SABC-Cy3(参 考 效 价 1:100)或SABC-POD(参考效价 1：100)，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
8．显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选 DAB。自来水充分冲洗。
9．根据需要进行苏木素复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂或抗荧光衰减封片剂封片。
10．结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
建议：
1．热修复可选用枸橼酸盐缓冲液、EDTA 抗原修复液、PBS 缓冲液、TBS 缓冲液等作为抗原修复液。
2．酶修复可选用复合修复液、抗原修复液Ⅰ、胰蛋白酶、胃蛋白酶消化组织。


北京现货超敏化学发光底物(A液+B液)销*(代"售")关键词：超敏化学发光底物,超敏化学发光底物(A液+B液),ZN1944,百奥莱博


·HGF mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0651
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.HGF mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
HGF的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


北京现货超敏化学发光底物(A液+B液)销*(代"售")关键词：超敏化学发光底物,超敏化学发光底物(A液+B液),ZN1944,百奥莱博

298-93-1 MTT 噻唑兰
棕榈油酸甲酯 4-Phenylazophenol 1120-25-8
D-组*酸 D-Phenylalanine 351-50-8
McIlvaine缓冲液(pH3.0-8.0)   500ml
146-68-9 INT 碘硝基*化四氮唑蓝
ARB11746 人嗜铬蛋白A(CgA)酶标法分析 Human chromogranin,cga ELISA KIT
ARB10154 人S100*结合蛋白A8/*粒蛋白A(S100A8)elisa测定使用说明书 Human s100 calcium binding protein a8/calgranulin a,s100a8 ELISA KIT
PY02-119  *化*三糖铁琼脂  250克  
SJ0721 苏木素染色液
CYB161027 大鼠IgG(冻干粉)
HC0288 Biohit单道可调整支灭菌移液器系列
Acr-Bis(40%,39:1)   500ml
L-*丙*醇 DL-Isocitric acid trisodiu*(代"m") salt 3182-95-4
BTN80920 96孔板血液DNAOUT(离心法) 96 Microwell Plate Blood DNAOUT
ARB12349 大鼠尿激酶(UK)检测服务 Rat urokinase,uk ELISA KIT
BL0894 FITC标记兔抗人IgA抗体
HC0038 黑色酶标板(不可拆)25块/包
BTN60801 柱式腐殖酸清除剂 Column Humic Acid Erasol
BTN100940 石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒 FFPE WGA Kit
9003-98-9 脱氧核糖核酸酶 DNAseⅠ
5×A-plus MasterMix 20次
DN0401 大量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)

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