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- roche
- 罗氏10742988001
- 2025年11月06日
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−20°C
- 英文名：
Restriction Endonuclease Dpn I
- 供应商：
嵘崴达
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- 规格：
1000 UNITS
Dpn I
from Diplococcus pneumoniae
别名:
Dpn I
一般描述
Dpn I需要腺嘌呤残基甲基化才能发挥活性，因此只能消化包含N6-甲基腺嘌呤的GmATC序列。这样的甲基化序列是由dam甲基化酶产生的。甲基化的这种要求将Dpn I与Mbo I和Sau3A I区分开来，其中Mbo I的活性会被dam甲基化所抑制，Sau3A I不会受到甲基化的影响。并且，Dpn I在识别序列上的切割位点也与Mbo I和Sau3A I不同。
同裂酶
该酶是Bsp143 I、Dpn II、Mbo I、Nde II和Sau3A I的同裂酶。
甲基化敏感性
如果不存在6-甲基腺嘌呤，该酶仅在指定位点（*）处出现5-甲基胞嘧啶时发生抑制。
典型的连接和再切割检测
将通过完全消化1μg pBR322 DNA所获得的Dpn I片段在+4°C下与1U T4 DNA连接酶在10μl含有66mM Tris-HCl、5mM MgCl2、5mM二硫苏糖醇、1mM ATP、pH 7.5（在+ 20°C时）的缓冲液中连接16小时。可连接并随后用Dpn I重新切割的产物的百分比（产生pBR322×Dpn I片段的典型模式）已在分析证书的“Lig”和“Rec”下列出。
特异性
识别位点：GmAT * C
GmAT * C
限制性切割位点：GmA↓T*C
GmA↓T*C
热灭活：在65°C孵育15分钟后Dpn I未失活。
应用
在PCR介导突变中，DpnI核酸酶已被用于PCR后的野生型DNA的消化。
10742988001 Restriction Endonuclease Dpn I 1000 UNITS
| 10742970001 | Restr.-Endonucl. Dpn I, 200u | 200 U (10 U/µl) |
| 4905270001 | Anti-His6-Peroxidase (2) | 80 U |
| 4340868001 | Pwo SuperYield DNA Polymerase | 100 U |
| 11495062001 | Reverse Transcriptase AMV, 500 | 500 U |
| 11483188001 | First Strand cDNA Synt. Kit fo | 1 kit (30 reactions) |
| 11087789001 | Collagenase H, 2.5g, non-steri | 2.5 g |
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文献和实验Restriction Endonuclease Digestion of DNA
The ability to cleave DNA at specific sites is one of the cornerstones of today’s methods of DNA manipulation. Restriction endonucleases are bacterial enzymes that cleave duplex DNA at specific target sequences with the production of defined
Isolation and Characterization of an Unknown Restriction Endonuclease
contain at least one restriction endonuclease (2 ), and therefore the probability of encountering new ones is relatively high. Indeed, many new enzymes have been “discovered” in contaminated bacterial cultures. The presence of three restriction activities
Restriction Endonuclease Digestion and Agarose Gel Electrophoresis of DNA
. These enzymes are known as Type II restriction endonucleases, and they allow us to cut DNA molecules in a reproducible fashion. This precision cutting is essential for many of the procedures of genetic manipulation. Circular plasmid molecules must be cut
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