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嵘崴达
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- 英文名:
DIG-Nick Translation Mix, 5x conc.
- 规格:
160 μL
DIG-切口平移混合物
sufficient for 40 labeling reactions, pkg of 160 μL, suitable for hybridization
别名:
nick translation
一般描述
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代核酸放射性标记和检测。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
DIG-缺口平移混合物是用于缺口平移的方便的酶和核苷酸混合物。其利用DNA酶和DNA聚合酶的组合来切割DNA螺旋的一条链,然后在聚合酶检查或“校对”切口位点时掺入标记的核苷酸。大质粒、粘粒和聚合酶链式反应(PCR)片段都常用于该方法,同时DNA可以是线性化或超螺旋的。单个模板在标准的90分钟反应中可产生一致的结果,并且生成的平均探针长度为200bp,最多为500bp。调整地gao辛配基(DIG)-11-三磷酸脱氧尿苷(dUTP)与三磷酸脱氧胸苷(dTTP)的摩尔比,以确保新合成的DNA中每20至25个核苷酸被DIG修饰。DNA中这一半抗原的密度可在免疫检测反应中产生最高的灵敏度。
特异性
热灭活:通过加入1 μl 0.5M EDTA(pH8.0),并加热至65℃10分钟来终止反应。
应用
DIG-缺口平移混合物用于生成高灵敏度的地gao辛-11-dUTP标记原位杂交探针。
注意:该混合物也可用于过滤杂交技术,但是,对于高灵敏度的过滤杂交探针,我们建议您使用Roche Applied Science的DIG-High Prime。
对于使用其他半抗原和荧光团的非放射性标记原位探针,Roche Applied Science提供了Biotin-切口平移混合物和切口平移混合物(无核苷酸)。
质量
在点斑点检测中进行功能测试。
| 11745816910 | DIG-Nick Translation Mix, 5x conc. |
| 11093274910 | Anti-digoxigenin AP-conjungate |
| 10885819001 | pUC18 DNA,pUC18质粒DNA |
| 11004760001 | Random Primed DNA Labeling Kit,随机引物DNA标记试剂盒 |
| 11207733910 | Anti-digoxigenin POD-conjugate |
| 11442066001 | BM Blue POD Substrate, precipi,BM蓝色过氧化物基板 |
| 11633716001 | Anti-Digoxigenin-POD (poly) |
| 11585606910 | DIG High Prime 160ul |
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文献和实验DNA labeling by nick translation
2.5 µl EDTA (0.5 M, pH 8.0) and 2.5 µl SDS (20%) to stop the reaction, keep the probes at -20℃ until hybridization Optimal fragment length after nick translation DNA after agarose gel
DNA labeling by nick translation
after addition of new DNAse and Pol -->add 2.5 µl EDTA (0.5 M, pH 8.0) and 2.5 µl SDS (20%) to stop the reaction, keep the probes at -20℃ until hybridization Optimal fragment length after nick translation DNA after agarose
amt / reaction 5x transcription buffer 20ul 10 x DDT 10ul DDW 40ul rNTP 20
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