胶原酶H/Collagenase H

胶原酶 H

Collagenase H

from Clostridium histolyticum

General description

胶原酶 H 是溶组织梭菌培养物经过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干制成的酶混合物。

Specificity

胶原酶可降解天然胶原。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也能降解其他蛋白质。

Application

溶组织梭菌产生的胶原酶用于分离组织，以建立原代细胞培养物。胶原酶 H 非常适合于通过胶原酶灌注法从大鼠肝脏中分离肝细胞。该酶制剂还适用于制备大血管内皮细胞等其他类型细胞，以及从大鼠附睾脂肪垫中分离脂肪细胞。

Physical form

非无菌冻干品

Preparation Note

酶活性：
胶原酶活性：0.15U/mg（按 Wünsch 计）（+ 25℃，以 4-苯基-偶氮苯氧羰基-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-脯氨酸-D-精氨酸为底物）。
污染酶活性：胰蛋白酶、梭菌蛋白酶和总蛋白水解活性
胶原酶 H 具有平衡的酶活性，用于分离大鼠肝细胞（灌注法）。
抑制剂：
胶原酶抑制剂：EDTA、EGTA、Cys、His、DTT
血清不能抑制胶原酶。
梭菌蛋白酶抑制剂：TLCK
胰蛋白酶抑制剂：抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂（蛋清、大豆）
活化剂：Ca²⁺
工作浓度： 0.5～2.5 mg/mL，
分离大鼠肝细胞约 1 mg/mL，分离脂肪细胞约 2 mg/mL。
储存条件（工作溶液）：-15℃ 至-25℃
对于短期储存，复溶溶液应在-15℃ 至-25℃ 下储存；对于长期储存，应在-60℃ 下储存，或按照下文所述。