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- 供应商:
嵘崴达
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- 英文名:
Pefabloc® SC PLUS
- 规格:
5 ML
Pefabloc® SC PLUS
crystalline, suitable for blocking, suitable for protein purification, 0.1-1.0 mg/mL
别名:
pefabloc, serine protease inhibitor
一般描述
Pefabloc SC是一种特异、有效、不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂。其抑制活性与PMSF或DFP相当,但Pefabloc SC对细胞无毒。Pefabloc SC PLUS套装结合了丝氨酸蛋白酶抑制剂Pefabloc SC和一种独特配方的Pefabloc SC保护剂(PSC-Protector),除了可提供Pefabloc SC安全、稳定的蛋白酶抑制外,也额外增加便利性和可靠性。
最近的发现表明,磺酰基型丝氨酸蛋白酶抑制剂如Pefabloc SC和PMSF可与蛋白共价结合。这种情况会发生在使用高浓度抑制剂或在碱性条件下延长孵育时间时。这种相互作用会对蛋白的酪氨酸和赖氨酸残基以及游离氨基末端产生不利影响。该套装中所包含的PLUS添加剂(PSC-Protector)可防止在较高浓度并在碱性pH下延长孵育时间时Pefabloc SC与蛋白共价连接。
特异性
Pefabloc SC属于磺酰氟类,能够不可逆地阻断丝氨酸蛋白酶。Pefabloc也被视作有效的丝氨酸苏氨酸磷酸酶抑制剂。
特异、有效和不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂。Pefabloc SC的抑制活性与PMSF或DFP相当;然而,Pefabloc SC是无毒的。如质谱检测所得,可特异性地抑制丝氨酸蛋白酶并防止蛋白的非特异性共价修饰。
应用
- Pefabloc® SC可用于在制备型蛋白纯化过程中抑制蛋白酶的有害作用。当Pefabloc以较高浓度使用并在碱性pH下延长孵育时间时,PSC-protector溶液可防止蛋白的非特异性共价修饰(通过质谱法测试)。
- 由于其对真核细胞的低毒性,可以在转化细胞的发酵过程中用于重组蛋白的生产,在该生成过程中蛋白的水解消化可能会降低所需产物的产量。
- Pefabloc SC可用于在琼脂糖栓中制备染色体DNA时完全灭活蛋白酶K。为此目的,细胞被包埋在琼脂糖中并用蛋白酶K消化以降解所有的蛋白。在加入特异性限制性内切核酸酶之前,可通过+ 37 ℃将琼脂糖栓孵育在10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH7中的1 – 5 mM Pefabloc SC中2小时或过夜,使蛋白酶K失活。
- 与PMSF相比,Pefabloc SC是血清或血浆中凝血酶活性的一种ji佳的阻断剂。在这些生物体液中,PMSF是以一种可逆的方式与白蛋白相互作用,从而降低其游离的浓度并导致凝血酶失活的延迟。然而,Pefabloc SC不与血清白蛋白反应,并在类似条件下表现出三倍更高的灭活凝血酶的能力。
- Pefabloc SC可被用于活细胞。
Pefabloc® SC PLUS已被用于洋地黄皂苷提取缓冲液和THP-1 细胞组织蛋白酶B活性检测缓冲液。它还被用作强碘克沙醇溶液和蔗糖缓冲液的一种成分,用于分离蟾蜍胚胎核。
特点和优势
- 利用简化的双试剂系统。使用PSC-Protector溶液可防止蛋白质与Pefabloc SC之间的共价结合,即使在高浓度、延长的孵育时间和碱性pH下也是如此。
- 享受易用型抑制剂的优势。将水溶性的Pefabloc SC直接加入到水相缓冲液中。
- 避免有害化合物。获得无毒的蛋白酶抑制,对您或您周围的人没有风险。
- 确保具有更好稳定性的保护。即使在pH值高于7.0且温度高于+4°C时也能实现一致的蛋白酶抑制效果。
- 最大化抑制。通过使用可靠且稳定的产品,以确保抑制剂具有足够高的活性水平。
包装
1个试剂盒包含两种组分。
| 11873601001 | Pefabloc PLUS, set II | set I |
| 3703126001 | Annexin-V- Alexa 568 | 500 µl (250 tests) |
| 10652202001 | Transferrin | 20 ml (30 mg/ml; in IMDM, sterile) |
| 10838039001 | Fibronectin, 5 mg, sterile | 5 mg sterile |
| 11363743001 | Nutridoma-CS (50x) | 10 ml (50x) sterile |
| 11412272001 | Transforming Growth Factor-b1, | 1 µg (1 ml) |
| 11684795910 | In Situ Cell Death fluorescein | 1 kit (50 tests) |
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文献和实验(precool Heraeus centrifuge in E2) aspirate supernatant, add 10 ml WASH 2 (PBS, 5 mM EDTA, 5 µg/ml Leupeptin+ 0.5 mM Pefabloc SC) centrifuge 4 min at 1000 rpm (table top centifuge, falcon 15 ml tubes) at 4°C aspirate supernatant, add 5 ml WASH
Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay
(precool Heraeus centrifuge in E2) aspirate supernatant, add 10 ml WASH 2 (PBS, 5 mM EDTA, 5 µg/ml Leupeptin+ 0.5 mM Pefabloc SC) centrifuge 4 min at 1000 rpm (table top centifuge, falcon 15 ml tubes) at 4°C aspirate supernatant, add 5 ml WASH
包涵体表达蛋白的纯化方法Purification of Expressed Proteins from Inclusion Bodies
or Pefabloc SC Inclusion body solubilization buffer II 50 mM KH2 PO4 (pH 10.7) 1 mM EDTA (pH 8.0) 50 mM NaCl KOH (10 N) PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride)(17.4 mg/ml
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








