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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
645
- 靶点:
IgG(H+L)
- 级别:
单克隆
- 目录编号:
WE0360
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
小鼠
- 保质期:
二年
- 抗体英文名:
Donkey Anti-Mouse IgG, FITC Conjugated
- 抗体名:
FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L)
- 标记物:
FITC
- 宿主:
驴
- 适应物种:
小鼠
- 免疫原:
小鼠IgG(H+L)
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 应用范围:
Flow-Cyt/IF
- 浓度:
1mg/ml
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L)折扣价在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L)折扣价
编号:WE0360
规格:100μl
品牌:百奥莱博
本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,检测灵敏度高,本底低。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究,在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
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FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L)折扣价关键词:FITC标记抗小鼠IgG(H+L)二抗,FITC标记二抗,驴抗小鼠二抗,小鼠IgG(H+L)抗体
·DNA/RNA提取试剂盒
编号:WE0203
英文名称:NuPure DNA/RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒可用于从同一细胞或组织样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。由于不需要将样本分成两份用于不同的纯化步骤,该试剂盒可最大限度的回收DNA和RNA。纯化的DNA和RNA被单独洗脱并可直接用于各种下游实验。本试剂盒中不包含*酚和*仿等有毒物质,无需乙醇沉淀,操作简单、快捷。基因组DNA可用于PCR、Real-time PCR、Southern Blot、 Dot Blot、 比较基因组杂交(CGH)、 基因分析和SNP分析; 总RNA可用于RT-PCR、 Real-time RT-PCR、cDNA的合成、Northern Blot、Dot Blot等分析。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 100个 |
自备试剂:β-巯基乙醇(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(用无RNase的水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用RNase-Free Water。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响提取DNA和RNA的质量。样品在Buffer RL中,可于-70℃保存一个月。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer RW2、Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请于56℃水浴重新溶解。
6、所有离心步骤均使用台式离心机,室温下进行。
操作步骤:
1、材料处理
① 贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(最大提取量为107个细胞), 收集细胞,弃尽培养液,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),反复吹打使其充分裂解。
注意:一定要弃尽培养液,否则影响裂解和后续的核酸纯化步骤。
② 取不大于30 mg的动物组织,液氮研磨成细粉末,加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),或直接加入600μl Buffer RL(用前检查是否加入β-巯基乙醇),匀浆处理。
注意:匀浆要充分,否则影响RNA产量。
2、将上步所得溶液12000rpm(~~13400×g)离心3-5分钟,小心的将上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心30-60 秒,收集滤液。将吸附柱DM放在一个新的收集管中,室温或4℃放置,待提DNA。
注意:确保吸附柱DM上没有液体残留,如果有必要可以重复离心,直至所有的液体通过吸附柱DM的膜。
总RNA提取
3、向步骤2所得滤液中加入1倍体积的70%乙醇(无RNase的水配制),混匀。
4、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱RM中,若一次不能全部加完溶液,可分次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
5、向吸附柱RM中加入700μl Buffer RW1, 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
6、向吸附柱RM中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒, 倒掉收集管中的废液,将吸附柱RM重新放回收集管中。
7、重复步骤6。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱RM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:此步骤目的是去除吸附柱RM中残余的乙醇,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱RM置于一个新的无RNase1.5ml离心管中,向吸附柱RM的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
① RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤9。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤9。
基因组DNA提取
10、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放收集管中。
11、向吸附柱DM中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇), 12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱DM放回收集管中。
12、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱DM置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱DM中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱DM置于一个新的无RNase 1.5ml离心管中,向吸附柱DM的中间部位加入100μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
① Buffer GE的体积不应小于100μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高DNA的产量,将100μl新的Buffer GE加至吸附柱上,重复步骤13。
③ 如果要提高DNA浓度,可以将步骤15所得的DNA洗脱液重新加至吸附柱上,重复步骤13。
储存条件:室温(15~30℃)
FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L)折扣价关键词:FITC标记抗小鼠IgG(H+L)二抗,FITC标记二抗,驴抗小鼠二抗,小鼠IgG(H+L)抗体
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文献和实验min。②荧光素的准备 根据欲标记的蛋白质总量,按每毫克免疫球蛋白加0.01mg荧光色素,用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。也可用下述公式计算出免疫球蛋白、荧光素的量,还可以算出需加缓冲液的量。a.蛋白溶液:含量Amg/m1;容积Bml。b.总蛋白量(AXB)=Crag。c.C/20~C/10=Dmg(如蛋白含量低于20mg/ml,用C/10;如高于20mg/ml,用C/20)。d.荧光素FITC的量:(1/50~2/100)XC=Emg。e.巳0.5mol/L(pH9.5)碳酸盐缓冲
浓度为20mg/ml,缓冲液容量为总量的1/10,混匀,将三角烧瓶置冰槽中,电磁搅拌速度适当,即以不起泡沫为宜搅拌5—10min; 2. 荧光素的准备。根据欲标记的蛋白质总量,按每毫克蛋白加0.01mg荧光素的比例,用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末; 3. 结合(或称标记)。将称取的荧光色素缓慢加入到球蛋白溶液中,并不停地搅拌,避免将荧光素粘于三角烧瓶壁或搅拌玻璃棒上,在大约5—10min内加完。然后继续搅拌12—18h。因荧光素与球蛋白结合期间要求必须
ml三蒸水中即成; 方法与步骤: 根据Marshall氏法高效价的抗人球蛋白兔免疫血清,分离球蛋白。 1. 用0.15 mol/L NaCl的盐水及0.15 mol/L pH9.0的NaHCO3-Na2CO3缓冲液稀释使每毫升内含抗体10mg,缓冲液为总量的10%; 2. 将以上溶液降温至4℃,按蛋白:荧光素=50—80mg:1mg的比例加入异硫氰酸荧光素,在0—4℃下电磁搅拌12—14h; 3.用半饱和硫酸铵将标记球蛋白
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