T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)价格厂家

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T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)价格厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)价格厂家
产地：国产|进口
规格：500U|2500U
品牌：百奥莱博
英文名：T4 Polynucleotide Kinase
  T4多聚核苷酸激酶，是由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体，可以催化磷酸在ATP的γ-位和寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷间进行转移和交换，同时还具有3’磷酸酶活性，能将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解掉。该T4多聚核苷酸激酶可用于寡核苷酸、DNA或RNA的5’末端标记或磷酸化；催化3’磷酸化的单核苷酸5’磷酸化以及去除3’端磷酸基团等。本品于75℃加热10分钟可使其失活，加入EDTA也可使其失活，金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50 mM的KCl和NaCl均可显著抑制其活性。

除T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)价格厂家外，我公司正在打折促销以下产品：

·血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)
编号：WE0188
英文名称：Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
规格：4×96次
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(带有抗凝血剂，如柠檬酸盐、EDTA或肝素等)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中的总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本试剂盒广泛的应用于临床样品的检测，可以同时处理96个样品，采用96孔吸附板可以特异性吸附结合DNA，经过纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、Real-Time PCR、酶切和Southern Blot等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer RCL	2×500ml
Buffer GR	2×50ml
Buffer GL	2×50ml
Buffer GW1(浓缩液)	2×52ml
Buffer GW2(浓缩液)	2×50ml
Buffer GE	60ml
蛋白酶K	90 mg
蛋白酶K 储存液	2×5ml
吸附板及收集板	4套
收集板	4块
封板膜	16张

保存条件：Buffer RCL 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)。

自备试剂：无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入9ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、实验前配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液，每200μl Buffer GL中加入20μl蛋白酶K ，该溶液最好现用现配，在使用前配制时间最多不超过1小时。
6、使用排枪时注意不要打湿96孔板孔口，以防止离心过程中有液体溅出产生交叉污染。

操作步骤：
1、样本处理：
a. 将200μl样本加到收集板中。不足200μl的样本，加Buffer GR补足至200μl。
b. 样本超过200μl，且不超过600μl时，将血液样本加到收集板中，加入样本2倍体积
的Buffer RCL，吹打20次混匀，加盖新的封板膜，3600 rpm(～1200×g)离心10分钟。揭去封板膜，吸弃上清(可留下100μl液体以避免吸到细胞沉淀)。再加入样本2倍体积的Buffer RCL，吹打10-20次混匀，加盖新的封板膜，3600 rpm离心10分钟。揭去封板膜，吸弃上清，剩余约200μl液体。
注意：
1)在收集板上做好标记，以方便后续实验对样品的辨识。
2)如果样品为鸟类的血液，建议样品用量少于10μl。
2、配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液：按照200μl Buffer GL中加入20μl的蛋白酶K 的比例配制，混匀。
3、向每孔中加入220μl Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液，吹打20次，混匀。加盖新的封板膜，短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
4、56℃孵育10分钟。
注意：孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、揭去封板膜，加入200μl无水乙醇，吹打20次，混匀。短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集板的吸附板中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
7、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇)，3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
8、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
9、3600 rpm离心10分钟，倒掉收集板中废液。将吸附板置于室温数分钟以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附板中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附板置于一个新收集板中，向吸附板每孔中间部位悬空加入80-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，3600 rpm离心10分钟，收集DNA溶液，加盖新的封板膜。-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。


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