FastStar热启动DNA聚合酶价格

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括FastStar热启动DNA聚合酶价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：FastStar热启动DNA聚合酶价格
编号：WE0122
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：500U|2500U
英文名：HotStar DNA Polymerase
  HotStar DNA Polymerase是抗Taq酶单克隆抗体和WE0101 Taq DNA Polymerase的混合制品，适用于Hot Start PCR。使用Taq酶抗体进行PCR扩增时，高温变性前由于Taq酶抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性，能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq酶抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到热启动效果。使用本品无需特殊地对Taq酶抗体失活处理，可以在常规PCR反应条件下使用。
  HotStar DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切酶活性，无3"→5"外切酶活性，酶延伸速度2 kb/min，可以扩增长度达5 kb的片段。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。

产品组成：

 

组份	500U	2500U
HotStar DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl	5×100μl
10×PCR Buffer	1.8ml	5×1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
HotStar DNA Polymerase,5U/μl	0.25-0.5μl	1.25-2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：可以在室温下配制反应液，须将试剂置于冰上。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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偶氮*膦mA Quinacrine dihydrochloride 86167-87-5
F030609 FITC标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*FITC
间羟基联*(代"*") Josamycin 580-51-8
麦芽糖醇 L-(+)-Ribose 585-88-6
PY02-388  改良鲍姜氏琼脂培养基  250克  
2′-脱氧肌苷-5′-单磷酸二*盐 Bismuth subnitrate 14999-52-1
ARB12153 大鼠白介素18(IL-18)尿液中含量检测 Rat interleukin 18,IL-18 ELISA KIT
乙酸*溶液(3mol/L,pH5.5)   500ml
8002-43-5 蛋黄卵磷脂/卵磷脂(蛋黄)
BTN90407 Lambda DNA Lambda DNA(λ DNA)
ARB11248 人轴突生长诱向因子4(Ntn4)检测服务 Human netrin-4,ntn4 ELISA KIT
13721-39-6 原钒酸*(化学纯) Sodium orthovanadate 
ARB13404 红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)酶标法分析 Cherax quadricarinatus lipovitellin/vitellin,lv/vn ELISA KIT
庆大霉素硫*(代"酸")盐 Azure Ⅱ eosin 1405-41-0
FastStar热启动DNA聚合酶价格关键词：HotStar DNA Polymerase,WE0122,FastStar热启动DNA聚合酶

BL0236 DEAE葡聚糖凝胶 A-50 DEAE Sephadex A-50
ARB10069 人C4结合蛋白(C4BP)尿液中含量检测 Human c4 binding protein,c4bp ELISA KIT
酸溶血定性检测试剂盒   50T
ARB10358 人心纳素(ANF)elisa检测说明书 Human atrial natriuretic factor,anf ELISA KIT
F010204 小鼠抗人IgM抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgM
细胞核分离试剂盒(蔗糖密度法)   50T
ARB13844 猪口蹄疫(FMD)尿液中含量检测 
SJ0542 Sepharose CL-2B
DP112 酵母质粒小提试剂盒
ARB11376 人前列腺酸性磷酸酶(PAP)Elisa定量检测 Human prostatic acid phosphatase,pap ELISA KIT
F020104 兔抗酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein
BL1218 亮绿SF染色液(1%)
FastStar热启动DNA聚合酶价格关键词：HotStar DNA Polymerase,WE0122,FastStar热启动DNA聚合酶


·丽春红染色试剂
编号：WE0305
英文名称：Ponceau Stain Reagent
规格：100ml
  丽春红为常用蛋白质染色剂。试剂本身带负电荷，既可与带正电荷的*基酸残基相结合，也可与蛋白质非极性区结合，从而在印迹膜上形成清晰的红色条带；同时这种结合具有可逆性，染色后可用蒸馏水、PBS缓冲液或其它适当溶液进行漂洗脱色，对后续实验不产生影响。本产品可用于检测Western Blot实验中PVDF或NC膜上蛋白，以检测蛋白的转膜效率；具有灵敏度高，使用方便等优点。

注意事项：
1、丽春红染色试剂不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
2、使用本品时，请穿着实验服并佩戴手套进行操作。
3、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：
1、蛋白转移完毕后，将PVDF或NC膜完全浸没在Ponceau Stain Reagent(丽春红染色液)中，摇动染色3-5分钟。
2、使用纯水、PBS缓冲液或其它适当溶液对印迹膜进行漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除未与蛋白结合的染料，直至膜上出现清晰条带。
3、检测结束后，再次使用纯水，PBS缓冲液或其它适当溶液对印迹膜进行漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除与蛋白结合的丽春红染料。
4、按照正常步骤，进行后续的Western Blot检测。

储存条件：室温

·2×Bes Taq MasterMix(含染料)
编号：WE0104
英文名称：2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
规格：1ml|5ml|25ml
  本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，超过98%的PCR扩增能一次成功，同时复杂模板也能得到有效扩增，并可最大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

产品组成：

组份	1ml	5ml	25ml
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml	5×5ml
ddH2O	1ml	5×1ml	5×5ml

注意：2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase，3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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