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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
EMSA Probe Biotin Labeling Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
20次
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM0089 | EMSA探针生物素标记试剂盒 | 20次 | 1399.00元 |
Transferase(TdT)把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3'末端,然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3'末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3'-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3'端突出的双链DNA要比平端或3'端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3'末端加NTP的反应。
本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。
本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。
如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM008-1 | TdT Buffer(5X) | 250μl |
| LM008-2 | TdT(10U/μl) | 20μl |
| LM008-3 | Biotin-11-dUTP(5μM) | 100μl |
| LM008-4 | Biotin-Control Oligo(0.4μM) | 100μl |
| LM008-5 | Ultrapure water | 1ml |
| LM008-6 | 探针标记终止液 | 200μl |
| LM008-7 | TE | 15ml |
| LM008-8 | 退火缓冲液(10X) | 150μl |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:
需自备用于检测探针标记效率的带正电荷尼龙膜,以及用于生物素检测的相关试剂。带正电荷尼龙膜(LM12/LM16)可以向联迈生物订购。相应的用于生物素检测的化学发光法EMSA试剂盒(LM009)也可以向联迈生物订购。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验公司的Atlas Pure Total RNA Labeling System: 这是一个从Total RNA中制备同位素标记的cDNA探针的试剂盒。利用生物素偶联的Oligo(dT)和磁珠偶联的Streptavidin将mRNA吸附到磁珠上,加入MacroArray(包括尼龙膜基质和塑料基质)提供的基因特异引物混合物(CDS Primer)、同位素标记物和逆转录酶,直接在磁珠上合成同位素标记的cDNA探针,最后从磁珠上洗脱标记好的探针,纯化后即可用于杂交。这个标记试剂盒可以从少至10μg
Chemiluminescent Hybridization & Detection Kit),即可组合出完整的非放射性检测分析系统。不过这个系统不适用于玻片基质的芯片的探针标记。 由于Atlas系列的DNA微阵列膜上每个点的核酸量有限,所以对标记探针的灵敏度要求非常高,一般情况下同位素是首选。如今Atlas SpotLight标记试剂盒特别提供逆转录所需的试剂,可以将2μg以上的mRNA或者50μg以上的RNA样品制备成生物素标记的单链cDNA探针,由于没有竞争性抑制,单链探针的灵敏度要大大高于双链探针。另外生物素标记
性很强,而且半衰期为14天,所以从定购到标记再到做完试验,必须14天完成,种种制约因素导致现代科技发展非同位素EMSA试验技术,这就出现了地高辛标记为探针的非放射EMSA实验技术.在实践中没多久,地高辛标记为探针的非放射EMSA实验技术就暴露了一个严重的缺陷,标记的探真纯化后灵敏度弱,导致实验结果的信号不行,最终就出现了现在的生物素标记探真的EMSA实验技术.配合化学发光技术良好的解决了灵敏度的问题,到目前为止, 生物素标记探真的EMSA实验技术广为应用! EMSA试验成功的关键
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