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- 百奥莱博
- QN1084-XFM
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
621
- 英文名：
SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货5×蛋白上样缓冲液(含DTT)厂家，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。
名称：北京现货5×蛋白上样缓冲液(含DTT)厂家
品牌：百奥莱博
规格：10ml
英文名：SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
编号：QN1084
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，*酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的*键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位)，电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。
使用说明：
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。
2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。
3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。
注意事项：
1、聚丙*(代"烯")酰胺凝胶浓度为8%时*酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右， 胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有*酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。
储存条件：-20℃，有效期12个月。
北京现货5×蛋白上样缓冲液(含DTT)厂家正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：
·胆酸
编号：QN0671
英文名称：Cholic acid
规格：5g
本品在实验中常用于非变性离子去污剂，膜蛋白提取等。
别名：胆汁酸
CAS号：81-25-4
分子式：C24H40O5
分子量：408.57
储存条件：室温
纯度：≥98％
性状：一水合物为白色片状结晶
溶解性：溶于甲醇后为无色至浅黄色略浑浊液体，参考浓度为50mg/ml
熔点：200～201℃
·博莱霉素
编号：QN0065
英文名称：Zeocin
规格：1.25ml|8×1.25ml
本品Zeocin是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素， 在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如：酵母菌)、植物细、动物细胞。
CAS：9041-93-4
分子式：C55H83N19O21S2Cu
分子量：1137.41
储存条件：-20℃避光
纯度：100 mg/mL
性状：淡绿色液体
浓度：100 mg/mL
Zeocin试剂是博来霉素抗生素家族的一个成员。 其抗性由编码一种 13,665 道尔顿蛋白质的 Sh ble 基因赋予。 在表达这种蛋白质的细胞中，Zeocin无法结合和切割细胞 DNA。 Zeocin对大多数好氧细胞有效，可用于选择哺乳动物和昆虫细胞系、酵母以及细菌。 选择细胞时，Zeocin的用量为 50-2000 ug/ml(通常 300 ug/ml)，具体取决于细胞类型。
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·AEC显色试剂盒(20×)
编号：QN1151
英文名称：AEC Peroxidase Substrate Kit,20×
规格：1ml|10ml
AEC底物显色试剂是一种可以通过过氧化物酶催化底物3－*基－9－乙基咔唑氧化形成红色不溶性产物，以此鉴定过氧化物酶活性，从而确定目标分子表达情况，该种方法权威而经典。其适用于辣根过氧化酶标记蛋白的免疫学检测(蛋白质免疫印记、免疫组织化学、以及原位杂交染色等)。产品性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。
试剂盒成分：
溶液 A浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
溶液 B浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
溶液 C浓缩液(20×)——————————————1ml/10ml
3-*基-9-乙基咔唑是过氧化物酶的生色底物，在过氧化物酶的催化下，过氧化*氧化AEC形成稳定的红色沉淀产物。该红色产物不溶于水，但溶于有机溶剂。该AEC底物显色试剂盒加入了增强显色试剂，敏感度大大提高。产品操作便捷，显色清晰，重复性好，适用于HRP系统的 IHC 和 Western Blot实验的酶促显色。
使用说明：
1．工作液配制：
取850ul无菌双蒸水，依次加入50ul溶液A、50 ul溶液B、50ul溶液C、混合均匀，即配成AEC工作液。如需要更大体积工作液，可按相应比例放大。此溶液必须现用现配，配好后避光保存，半小时内使用，过期后请将剩余的液体废弃。
2．显色：
1)蛋白质印迹膜显色：将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜浸入AEC工作液中)，显色时间一般为10-30min。显色完毕后，将膜浸入蒸馏水中，终止反应。
2)组织切片染色：向组织切片上加入适量AEC工作液，确保能充分覆盖样品。室温孵育10-30 min，避免光照，直至显色至预期深浅。可在显微镜下观察控制显色时间。显色后用蒸馏水洗涤即可终止显色反应。
3)对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可对其进行其他染料复染。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
注意事项：
1. 由于AEC生成的颜色产物为脂溶性，因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水，二甲*透明，中性树胶封片，须用水性封片剂封片。
2. 根据情况自行优化实验条件，调整显色时间，获得最佳显色效果。
3. AEC有一定毒性，操作时请采取必要的防护措施。
储存条件：2～8℃避光，有效期至少1年。
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文献和实验系统的负担，导致包涵体的形成。生长温度可能是影响大肠杆菌高度表达目的蛋白的最重要因素。低温培养能在一定程度上抑制包涵体的形成。IPTG 的浓度对表达水平的影响也非常大。所以通过试验确定最佳的培养条件是很必要的。6. 将所有样本室温最高速度离心 1 分钟，弃上清，沉淀重悬于 100 微升 1×SDS 蛋白上样缓冲液中，100℃ 加热 5 分钟，室温最高速度离心 1 分钟，取 15 微升样品上样于 SDS 聚丙烯酰胺凝胶，用 SDS－PAGE 观察表达产物条带，从而确定优化的培养条件。二、大量表达靶蛋白
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次（对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤）。 加入预冷的 RIPA 液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注：悬浮细胞，收集
从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物学活性。一、原理根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。二、试剂和器材1、tsk deae spw离子交换层析柱（75mm×7.5mm，bio rad）2、高效液相色谱仪（包括控制系统、溶剂传递系统、高压加压活门和紫外280nm
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