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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
455
- 英文名:
Western Blotting Mouse/Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家价格
编号:QN1159
规格:1盒
英文名:Western Blotting Mouse/Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色,含有抗小鼠/兔IgG酶标二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
试剂盒组分:
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml,效价1:500~3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。
常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜,封闭液内,摇床震动,室温封闭30min。用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量,按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色:根据用量,取TBS-T 4ml,加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul,混匀,加在膜正面,室温下显色。在目标条带显出后,而且背景未出时,放入水中终止显色。
注意事项:
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单,但其敏感性与ECL发光发有一定的差距,一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱,可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带,请检查前期蛋白处理及实验过程, 如果确认无误,反复两次依旧无结果,请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T(0.01M)配制方法:称取NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用800ml 的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH 到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
关于DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·通用引物 ITS4
编号:QN0954
英文名称:Universal primers ITS4
规格:250μl(10uM)
储存条件:-20℃
·5×Tris-甘*酸电泳缓冲液
编号:QN1102
英文名称:Tris-Glycine Running Buffer,5×
规格:500ml
本品是用于蛋白变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳实验(SDS-PAGE)中的缓冲试剂。 本产品按常规方法配制而成,为5×浓缩液,便于储存、操作简便。
组份浓度:125mM Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V)SDS
使用说明:本产品为 5×浓缩液,临用前稀释成 1×工作浓度:取 100ml 的 5×Tris-甘*酸电泳缓 冲液,加入蒸馏水或去离子水定容至 500ml 混匀。
注意事项:
1. 本产品为高倍浓缩液,环境温度较低时可能会有结晶析出,可加热助溶,待溶解完 全后再行稀释使用,密封保存,防止污染。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴手套操作。
储存条件:4℃
·三磷酸腺苷二*
编号:QN0570
英文名称:Adenosine-5"-triphosphate disodiu*(代"m") salt hydrate
规格:5g|25g
三磷酸核苷酸与各种角色在能量代谢、信号转导和核酸代谢。
别名:ATP二*
CAS号:987-65-5
分子式:C10H14O13N5P3Na2·3H2O
分子量:605.24
储存条件:-20℃
性状:无色结晶或白色结晶性粉末
·3-磷酸甘油酸激酶
编号:QN0392
英文名称:3-Phosphoglyceric Phosphokinase
规格:2KU
3-磷酸甘油酸激酶催化1,3-二磷酸甘油酸转变3-磷酸甘油酸,产生1分子ATP。这是无氧酵解过程中第一次生成ATP。由于是1分子葡萄糖产生2分子1,3-二磷酸甘油酸,所以在这一过程中,1分子葡萄糖可产生2分子ATP。
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·D-*基葡萄糖
编号:QN0180
英文名称:D-(+)-Glucosamine hydrochloride
规格:10g
别名:盐*(代"酸")*基葡萄糖;葡萄糖胺盐*(代"酸")盐
CAS号:66-84-2
分子式:C6H13NO5· HCl
分子量:215.63
储存条件:室温干燥保存
纯度:≥99%
性状:白色结晶粉末
溶解性:溶于水,参考浓度100mg/ml
·果胶酶Y-23(进口)
编号:QN0375
英文名称:PectolyaseY-23
规格:100mg
CAS号:9032-75-1
·尿苷-5"-二磷酸*盐
编号:QN0540
英文名称:URIDINE 5"-DIPHOSPHORIC ACID DISODIUM SALT
规格:100mg
本品常用在P2Y受体激动剂等科研实验方面。
别名:;5"-二磷酸尿苷*盐
CAS号:21931-53-3
分子式:C9H12N2Na2O12P2
分子量:448.12
储存条件:−20℃
·二乙酰一肟
编号:QN0003
英文名称:2,3-Butanedione Monoxime
规格:10g
CAS:57-71-6
分子式:C4H7NO2
分子量:101.1039
别名:2,3-丁二酮一肟;丁二酮单肟;二乙酰一肟
·ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)
编号:QN1155
英文名称:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
规格:1盒
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠/兔IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠/兔IgG二抗-————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)厂家价格关键词:Western Blotting Mouse/Rabbit IgG DAB Chromogenic ,小鼠/兔IgG,DAB法显色试剂盒,QN1159,DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)
·美满霉素
编号:QN0051
英文名称:Minocycline hydrochloride
规格:250mg|1g|5g
本品抗菌谱、抗菌机理均与四环素相同,其抗菌作用显著强于金霉素、四环素、土霉素,也比多西霉素、美他环素强。金葡萄对该品不易产生耐药性。对四环素耐药的金葡萄、链球菌、大肠杆菌对该品可能敏感。
CAS:13614-98-7
分子式:C23H28ClN3O7
分子量:493.94
储存条件:2~8℃
性状:黄色结晶性粉末。溶于水,遇光不稳定,味苦。
别名:盐*(代"酸")米诺环素;二甲胺四环素盐*(代"酸")
·加拿大树胶
编号:QN1255
英文名称:Canadabalsam
规格:100ml
加拿大树胶是浅黄至微绿色、粘性、透明、微有荧光的液体。有愉快香气。味苦。露置空气中渐变为固态的非结晶物质。能与*、*仿、二甲*、乙酸乙酯和香柏油等混溶。溶于乙醇、乙*(代"醚")、松节油和石油醚,不溶于水。相对密度0.987~0.994。折光率(n20D)1.52~1.54。
加拿大树胶主要用于生化研究。镜片及盖玻片胶粘,贴附显微镜标本。用作清漆。。加拿大树胶溶于二甲*后,它的折光率是1.52,接近于玻璃的折光率(1.51),透明度很好,用以封片几乎无色,干后坚硬牢固,可长期保存。因此,它是封片常用的封藏剂。市售的加拿大树脂有浓液体和固体两种。如果是固体,可以在树胶中加入约相当于树胶体积一半量的二甲*,放在温暖处,时常搅拌,促使树胶溶化。溶化后的较液浓度以胶液能沿玻璃棒一端顺利下流为宜(如果要封藏后使它干燥更快,可用*代替二甲*)。
注意:
1、不能加热,否则树胶立即变成深褐色,影响封片后的观察
2、树胶应贮存在棕色瓶内,避光保存
3、玻璃瓶口应密闭,以防蒸发凝固
4、为了防止树胶变酸,在树胶内加入几小块用二甲*清洗过的大理石,以中和酸性。
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文献和实验要,表明这种抗体可能存在种属差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。 4、种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。 5、生产厂家的选择。如 santa Cruz 公司抗体一般 1 ml,价格 2100 元左右;而 chemicon 公司一抗一般 100 μl,价格 2800 元左右。这两个厂家的同一种抗体,它的实际效价稳定是不同的,我一般用后者抗体做免疫组化效果较好,而前者做 WB 效果还可以。 三、在什么情况下使用
本文主要介绍 ELISA 试剂盒、实验样本、相关问题,帮助大家更好地开展实验 试剂盒 Q1:科研试剂盒与临床试剂盒的区别 ? A1:临床试剂是经过权威机构认可的,如 FDA、CFDA 等;而科研试剂一般是厂家自主研制,不需要通过权威机构验证。 经营临床诊断类产品的机构需要取得《医疗器械经营企业许可证》;经营科研试剂的机构不需要此证件。 临床试剂盒一般仅用于检测人血清/血浆等较为单一的分泌性样本类型;科研试剂盒的样本检测种类、检测范围则比临床试剂盒宽广得多。但一般来说,临床试剂盒的质量
差异,且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。 4.种属来源,一般兔来源的多是多克隆;而小鼠来源的多是单克隆,但也有另外。根据此来源来选择相应的二抗。 5.生产厂家的选择。如 santa Cruz 公司抗体一般 1 ml,价格 2100 元左右;而 chemicon 公司一抗一般 100 μl,价格 2800 元左右。这两个厂家的同一种抗体,它的实际效价稳定是不同的,我一般用后者抗体做免疫组化效果较好,而前者做 WB 效果还可以。 三、在什么情况下使用 Triton-X100? 1.Triton X
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