北京考马斯亮蓝G-250染液现货

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北京百奥莱博供应的北京考马斯亮蓝G-250染液现货用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多考马斯亮蓝G-250染液等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京考马斯亮蓝G-250染液现货
产地：国产|进口
规格：250mL
英文名：Coomassie Blue G-250 Stain Solution
编号：BTN80812
品牌：百奥莱博
考马斯亮蓝G250是最经典的SDS-PAGE染色方法，本产品就是基于此方法而开发的产品。

产品特点：
1．即开即用，不需要自己单独准备所有溶液。
2．不需昂贵仪器，肉眼即可观察结果，不象其他纳克级的染色方法需要贵重的仪器设备(如SYPRO 系列的高灵敏度的荧光染料需要荧光成像系统)。
3．与普通扫描仪等兼容，便于保存数据和后续处理。
4．灵敏度略高于考马斯亮蓝R250染色液。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	250ml
溶液B	250ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

1．按常规方法进行蛋白电泳。
2．凝胶电泳停止后，切除浓缩胶，转移分离胶至染色容器中。
3．倒入30-40mL溶液A，对1mm厚的PAGE胶，摇床上缓慢震荡至少10-15分钟。对1.5mm厚的PAGE胶，摇床上缓慢震荡至少2-3小时。
4．弃掉溶液A，再加入15-20mL溶液B。对1mm 厚的PAGE胶，摇床上缓慢震荡至少30-60分钟。对1.5 mm 厚的PAGE胶，摇床上缓慢震荡至少2-3小时。
5．弃掉溶液B，再加入30-40mL自备的10%的乙酸，缓慢摇动，直到在清晰的背景上出现亮蓝色的蛋白条带。一般需要1-2小时。
6．扫描或直接照相，留下实验记录。

除北京考马斯亮蓝G-250染液现货外，我公司正在打折促销以下产品：

·DNA快速连接试剂盒
编号：BTN70602
英文名称：Rapid DNA Ligation Kit
规格：100次
 DNA连接反应通过T4连接酶催化双链DNA的3´-OH和5´-P形成磷酸二脂键而将DNA共价连接在一起。被连接的DNA末端可以是粘末端(例如限制性切割EcoR I产生的末端)，也可以是平末端(限制性切割Sma I产生的末端)。Pheiffer等人发现PEG可以促进T4 DNA连接酶催化的连接反应[NAR，11，7853-7871，1983]，连接反应只需十分钟即可完成。

产品特点：
1.超快，整个连接反应只需要室温5分钟左右，反应液可以直接用于转化实验。
2.高效，溶液配方经过优化，每ug 插入DNA连接转化得到的重组子可达107左右。
3. 既可用于平末端连接，也可用于粘末端连接，包括PCR产物与T载体的连接。
4. 简单，客户只需要提供载体和插入片段即可。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	500μl
溶液B	100μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：连接反应
1.在无菌的离心管中严格按下表顺序加入列各成分(以10μl 体系为例):

成分	阴性对照管	样品管
溶液A	5μl	5μl
插入片段(自备)	-	0.2-0.5μg(注)
载体(自备)	50ng	50ng
无菌水	补水到9μL	补水到9μL

 注：插入DNA片段的摩尔数最好是载体的3-10倍，如果载体长度为3000bp，则所需插入DNA片段折合成重量(ng)＝(插入DNA片段bp 数×50 ng×N)÷3000bp。N就是自己选定的插入DNA片段与载体的摩尔比。
2. 最后在每管中加入1μl溶液B，轻柔吹打混合均匀后用微量离心机将液体全部甩到管底。
3.室温放置至少5分钟，最长可以放置过夜。
4. 70℃保温10分钟。此步可以灭活有关的酶，否则转化效率有所降低。
5. 根据使用的转化方法，每管各取适量用于转化实验，余下的放置在-20℃保存。

二：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
6. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
7. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀。
8.在冰上放置30分钟。
9. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
10. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
11. 将100μl 复苏涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(根据载体情况也可能需要加上X-gal和IPTG)。
12.室温4,000rpm离心剩余的900μl 复苏细胞5分钟，弃去800μL上清，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
13. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
14. 倒置平皿，于37℃培养，12~16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR 回收片段的质量。
15. 按常规方法筛选重组子。


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D-脯*醇 Neutral red 68832-13-3
ARB13198 小鼠脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PL-A2)酶免分析 Mouse lipoprotein-associated phospholipase a2,lp-pl-a2 ELISA KIT
ARB12708 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)elisa测定使用说明书 Rat phosphatidylinositol antibody igg/igm,pi ab-igg/igM ELISA KIT
ARB12818 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa检测操作说明书 Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,dppⅣ ELISA KIT
ARB13298 小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)代做ELISA实验 Mouse glycogen phosphorylase mm,gp-mm ELISA KIT
ARB13394 传染性犬肝炎病毒ICHV Elisa方法检测 
ARB11693 人硫氧化还原蛋白(Trx)酶标法分析 Human thioredoxin,trx ELISA KIT
2-*磷酸*盐 Benzamidine hydrochloride 14463-68-4
17504-044 B-27无血清添加剂
超低分子量蛋白Marker(3.3-22KD) 10次
BL0617 镍-琼脂糖凝胶H.P Ni Sepharose H.P
ARB11873 人糖链抗原19-9(CA19-9)Elisa方法检测 Human carbohydRate antigen19-9,ca19-9 ELISA KIT
ARB13698 兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)Elisa分析 Rabbit urokinase plasminogen activator,upa ELISA KIT
BTN131085 亲和素 Avidin
SJ0790 酒石酸
BTN130976 Oligo(dT)再生溶液 Oligo(dT)Recharger
BTN131116 pNPP干粉 pNPP
叔丁氧羰基-甲*磺酰基-精*酸 Arsenazo I 13836-37-8
PY02-044  庆大霉素培养基基础  250克  
Earle"s平衡盐粉剂(含**糖酚红)  1×EBSS 1L|10×1L
ARB10726 人异常凝血酶原(APT)酶标法分析 Human abnormal prothrombin,apt ELISA KIT
ARB12785 小鼠α干扰素(IFN-α)Elisa分析 Mouse interferon α,ifn-α ELISA KIT
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·BCA法蛋白定量试剂盒
编号：BTN80815
英文名称：BCA Protein Assay Kit
规格：500次
本产品是基于BCA法(bicinchoninic acid，二奎啉甲*(代"酸")法)蛋白检测原理开发的蛋白质浓度测定产品，BCA法跟Lowry法的第一步完全相同，就是在碱性条件下，蓝色的Cu2+被蛋白质还原成紫色的Cu+。此反应类似Cu2+与Biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2，双缩尿)发生的反应，故又叫Biuret反应(Biuret反应本省就可以测定蛋白质浓度，目前仍然是医院血液蛋白定量的方法)。第二步，Cu+与BCA发生反应形成水溶性的紫色化合物，通过分光在562nm处测定紫色化合物的量就可以精确定量蛋白质浓度。BCA 检测灵敏度比Biuret反应高100倍左右。


产品特点：
1．对各种常见的去污剂不敏感，但对Cu的还原剂和螯合剂比较敏感。
2．比Lowry法更加简单快捷，45分钟内完成测定。
3．试剂稳定，室温可以放置两年。工作液1 天内有效。
4．线性范围在 20～2000μg/mL。如果需要范围在0.1-10ug/mL，需要选用超敏BCA。
5．最小测量体积为1-20μL。
6．终产物稳定，变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
7．可以检测最短到双肽，而Bradford法需要一定大小的蛋白质。
8．有常规(试管)和微量(96孔板)两种检测模式。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	2ml
BSA标准品(2mg/mL)	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存)，有效期两年。

使用方法：

一：96 板操作模式
1．取一块96孔板，先进行编号(编号可以根据样品数增加)，并按照下表加入BSA 标准，待测样品和溶解待测样品的缓冲液(可以用水替代)：

编号	BSA 标准(2ug/uL)	待测样品(μL)	样品缓冲液(μL)	总体积(μL)	蛋白含量(μg)
0	0	0	20	20	0
1	1	0	19	20	2.0
2	2	0	18	20	4.0
3	4	0	16	20	8.0
4	8	0	12	20	16.0
5	12	0	8	20	24.0
6	16	0	4	20	32.0
7	20	0	0	20	40.0
样品1	0	X	补到20	20	未知
样品N	0	Y	补到20	20	未知

2．计算BCA工作液需要量：根据样品数量(包括制备标准曲线的样品的数量)和每个样品需要0.2mL BCA工作液的比例，计算所需BCA工作液的用量，然后加上10%损耗作为实际需要配制的量。例如：计算出需要5mL工作液，实际按不少于5.5mL的量配制。
3．配制BCA工作液：按50体积溶液A加1体积溶液B(50:1)的比例将二者充分混合，所得溶液即BCA工作液。比如：5mL溶液A+100μl溶液B。
注意：取用溶液A和溶液B前需要充分摇匀，溶液B非常容易形成沉淀，需要65℃加热溶解后才能使用。当把溶液B刚加入到溶液A中时，最初会出现淡绿色沉淀，轻微晃动沉淀即会消失，工作液最后成绿色，可以室温放置12 天，但需要将容器的盖子拧紧。
4．将10倍体积(即0.2mL)的BCA工作液加入到各孔中并混匀。如果用排枪加入并混匀则更好。也可把96孔板放在振荡器上振荡30秒混匀。
5．37℃放置30分钟。
6．冷至室温，10分钟内完成后续测定，否则化学反应还在继续进行，使光吸收值慢慢升高，每10分钟会升高2.5%左右。
7．在562nm下比色测定样品的光吸收。如酶标仪没有562nm的设定，可用接近的波长检测，如570nm。
8．将编号为0号的样品(对照)的读数从其余所有样品(包括0 号样品，其读数变成零)中扣除。
9．以0-7 号样品的BSA含量(μg，见上表最右行)为横坐标，以样品的吸光值为纵坐标，绘出BSA的标准曲线。
10．再将待测样品的吸光值(减去0 号样品的读数后的值)标在标准曲线上，其在横坐标上对应的蛋白含量(μg)就是待测样品中的蛋白质含量，除以样品稀释液总体积(20μl)，乘以样品稀释倍数即为样品浓度(μg/μL)。

二：试管测定模式
1、基本操作同上，只是操作改在编号的玻璃试管中进行，同时BSA 标准品(2ug/uL)的使用量从低到高改为0、5、10、20、40、60、80、100μL，样品的总体积从20μL 改为100μL，BCA工作液的用量从每个样品0.2mL 改为2mL。

三：注意事项
1．BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。所以，如果蛋白质浓度较低，可以改在60℃孵育30分钟或更长。
2．待测样品浓度在20～2000 微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
3．在一定浓度范围内BCA法测定蛋白浓度不受下列化学物质的影响：

名称	在此浓度下不受影响
Ammonium Sulfate	1.5 M
Brij-35	5.0%
CHAPS	5.0%
EDTA	10mM
Hepes	100mM
Glycine，pH2.8	100mM
Guanidine HCl	4.0 M
Tween 20、60、80	5.0%
SDS	5.0%
Sodium Acetate pH5.5	200mM
Sodium Chloride(NaCl)	1.0 M
Sucrose	40%
Sodium Hydroxide(NaOH)	0.1 M
NP-40	5.0%
Triton X-100	5.0%
Urea	3.0 M

4．本方法受样品中螯合剂和还原剂的影响，所以需确保EDTA浓度不高于10mM，二硫苏糖醇不高于1mM，β-巯基乙醇不高于1mM，没有任何EGTA，否则建议使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(BTN80815)。

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