北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货即用型荧光定量PCR试剂盒批发
产地：国产|进口
规格：1mL
英文名：Instant Fluorescent qPCR Kit
编号：BTN90408
品牌：百奥莱博
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒，可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分，用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析，具有广泛的用途。

产品特点：
1. 方便，用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料，信号强，不会抑制PCR反应。
3.快捷，即用型的预配液使加样操作步骤大大简化，避免了交叉污染，降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化，反应的灵敏度高，特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	100μl
易错PCR Mix，10×	300μl
易错PCR专用dNTP，10×	300μl
MnCl2，5mM	300μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为6个月。

使用方法：

1.以20μl的qPCR反应体系为例：在一干净的PCR管中，加入下列成分：

反应体系成分	20μl体系	终浓度
qPCR MagicMix，2×	10μl	1×
自备引物一	xμl	0.1-0.5μM
自备引物二	xμl	0.1-0.5μM
自备模板	xμl
自备ROX	2μl	(可以不加)
补超纯水到	20μl

放入荧光PCR仪中进行扩增，并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意：
a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考；通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
b)ROX 校正染料：如果使用ABI公司的7500，7700和7900三种型号的荧光PCR仪器，则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900，ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500，ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX；也可将10×ROX稀释到1×，然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音，因此，如果出现了杂峰，将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾，然后重新分析数据。
对于iCycler IQ，MJ Opticon，MJ Chromo4，MX3000，MX4000，RotorGene3000，RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器，ROX不是必须的，但加入的话也不会影响整个PCR分析。

2. 循环步骤：根据扩增子的性质和仪器性能，从以下三个过程中任选一个进行扩增。
两步快速循环法：适用于引物Tm值设计为60℃的反应

循环步骤	温度	时间	循环数
酶活化	95℃	10min	1
变性	95℃	15s	35-40
退火&延伸	60℃	1min

注意：本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
三步快速循环法：适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)

循环步骤	温度	时间	循环数
酶活化	95℃	10min	1
变性	95℃	10s	35-40
退火	56-64℃	30s
延伸	72℃	32s

注意：
·退火温度：建议采用两步法PCR，退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
·延伸温度：延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是，对于AT含量大于70%的扩增子来说，延伸温度设为60℃为宜。
通用循环法：这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪，也适用于用快速循环法不能扩增的模版。

循环步骤	温度	时间	循环数
酶活化	96℃	10min	1
变性	96℃	15s	35-40
退火&延伸	60℃	1min

3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时，最大吸收光谱在471nm，结合DNA时的最大吸收光谱在500nm，最大发射光谱在530nm。

注意事项：
1. 如果使用iCycler，可以不加入FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR，需加入终浓度为0.5mg/mL的自备BSA。

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·T4 DNA聚合酶
编号：BTN120411
英文名称：T4 DNA Polymerase
规格：50U
在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3´-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3´→5´核酸外切酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1000倍，也作用于双链DNA，在dNTP存在条件下表现出聚合酶活性，当dNTP用尽时转为3´→5´核酸外切酶的活性。本酶不含 5´→3´的核酸外切酶活性。

产品特点：
1．利用较强的3´→5´的核酸外切酶活性，通过置换合成(Replacement synthesis)从 DNA片段的3´末端进行标记。
2．DNA末端的平滑化。
3．通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点。

产品组成：

成份	规格
T4 DNA聚合酶	10μL
10×Buffer	1mL
0.1% BSA	500μL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以热变性小牛胸腺 DNA 为模板/引物，在37℃、pH8.8的条件下，30分钟内使10nmol全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：2U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

备注
1．本酶的最适 pH为8～9，在pH7.5及pH9.7时活性约为50%。
2．活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得最大活性，还需要SH基的还原剂存在。
3．整个反应体系中的离子强度超过100mM时活性将被抑制。
4．本酶易受模板 DNA高级结构的影响，T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶活性，而 3´→5´的核酸外切酶活性则完全被抑制。
5．在10×反应缓冲液中直接加入0.1% BSA时会产生大量白色沉淀，因此在调制反应液时请按下列顺序添加试剂：dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。


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·大肠杆菌Rosetta(DE3)化学感受态细胞
编号：BTN121004
英文名称：E.coli Rosetta(DE3) Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。本感受态细胞适用于真核蛋白表达，具有*霉素抗性。

菌株基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)pRARE(argU，argW,ileX，glyT，leuW，proL)(CmR)

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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ARB10378 人甘露糖凝集素受体(MBLR)定量分析 Human mannma binding lectin receptor,mblr ELISA KIT
BTN130925 鼻腔采样拭子 Nasal Swab
改良台氏液(无*)   500ml
岩藻多糖 TAPSO sodiu*(代"m") salt 9072-19-9
DP423 DNA RNA蛋白共提试剂盒
L-谷*酸 Indirubin 56-86-0
槲皮素 L-phenylglycine ethyl ester?HCl 6151-25-3
PL2001 BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型，转染级)
PY02-129  4-甲基伞形酮葡萄糖酸苷MUG培养基  100|25克  
ARB10021 人5,10亚甲基四*叶酸还原酶(MTHFR)elisa检测操作说明书 Human5,10methylenetetrahydrafolatereductase(mthfr)ELISA KIT
CYB163043 羊抗大鼠IgG(全分子)-FITC
Acr-Bis(45%,43.4:1.6)   500ml
蜜二糖 L(+)-Tartaric acid 585-99-9
BTN130902 酵母产孢培养基 Sporulation Medium
S-乙酰巯基丁二酸酐 Ninhydrin 6953-60-2
藻类膜蛋白提取试剂盒   50T|100T
ARB10736 人纤维连接素相关抗原(FRA)酶联免疫定量检测 Human fibronection related antigen,fra ELISA KIT
NF-262 冻干抗人AFP血清
达旦黄 Carboxypeptidase Y(Yeast) 1829-00-1
L-酪*酸二*盐 Norfloxacin 69847-45-6
BL21（DE3）化学感受态细胞 20×100ul
001014 大牛血清

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