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868
- 英文名:
T4 RNA Ligase 2
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
| 货号 | 规格 | 产品价格 |
|---|---|---|
| BTN130855-CPH | - | ¥160 - 2500 |
| BTN130855-VXZ | - | ¥120 - 1980 |
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) 工具酶,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) 工具酶
英文名:T4 RNA Ligase 2
规格:150U
编号:BTN130855
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
T4 RNA连接酶2 ,也被称为T4 Rnl-2(gp24.1),同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与T4 RNA连接酶1不同的是,T4 RNA连接酶2 对双链RNA切刻的连接活性要明显高于对单链RNA的末端连接。该酶连接时需要相邻的3´羟基与5´磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中RNA 3´羟基和DNA 5´磷酸基的切刻 。
产品用途:
1.连接粘性末端接头;
2.连接双链RNA中的切刻最佳用酶;
3.可用于DNA/RNA杂交链中,RNA 3´羟基与DNA 5´磷酸基的连接;
4.无单链和双链DNA核酸外切酶、核酸内切酶、RNase以及磷酸酶的污染。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
欲了解更多T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) 工具酶的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) 工具酶关键词:双链RNA连接酶,T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶),BTN130855,T4 RNA Ligase 2
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T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶) 工具酶关键词:双链RNA连接酶,T4 RNA连接酶2(双链RNA连接酶),BTN130855,T4 RNA Ligase 2
·软体动物RNA柱式提取试剂盒
编号:BTN101113
英文名称:Mollusc RNA column Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒专门从各种软体动物组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软体组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。
试剂盒特点:
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物,包括螺类、贝类、乌贼、章鱼和蜗牛等。
2. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
3. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
4. 操作简单,整个提取过程一般只需要10 多分钟。
5. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA 纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将50-200mg 新鲜或冷冻的软体组织液氮研磨成粉,加入1mL溶液A溶解(溶液A使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并摇晃混匀),然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中,振荡混合30秒。也可以将软体组织剪碎后与溶液A一起用Polytron 匀浆机(内切式匀浆机)匀浆5-20秒,再转移到1.5mL离心管中。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。
2.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3.室温12000~15000g离心3~5分钟,两相间将有约5-10 毫米厚的细胞破碎物。
4. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
5. 加入等体积的溶液C,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到自备的RNase-free离心管中,加入50-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
12. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。注意:测定OD时不要稀释过度,否则浓度会在仪器能测的范围之外。本方法提取的RNA 测OD时一般最多只能稀释10-20倍。
15. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
使RNA的 3′- OH末端与 5′ - 磷酸末端以磷酸二酯键而连结的酶。 EC 6. 5. 1. 3.是 J. Hurwitz等( 1972)从感染 T4 噬菌体的大肠杆菌中提取的,与促进该噬菌体尾部纤维结合的基因 63的蛋白质为同一物质。作为其反应机理,首先是酶与 ATP形成酶 - AMP复合体,复合体的 AMP与 RNA的 5′ - 磷酸末端形成焦磷酸键,它与 RNA的 3′- OH末端形成磷酸二酯键将 AMP游离出。一个 RNA链的 5′与 3′末端结合则生成一个环状分子。对基质
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
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